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一名叫做Desmond Miles的酒吧服務(wù)生，某天被一家叫做Abstergo的國際制藥集團綁架，對方的研究員告訴Miles，其實他是古代刺客宗師的直系后裔，需要分析他的DNA來提取祖先的記憶，因為他的祖先Altair知道伊甸園碎片的下落，通過這種方法，Abstergo可以找到這個神器的線索。盡管Miles對自己被綁架一事非常憤怒，但還是被研究員們強迫推入了虛擬機Animus之中，返回了12世紀的中東。 　　12世紀的圣殿騎士和刺客聯(lián)盟的爭斗一直延續(xù)著，Miles作為刺客宗師的后裔，找到了祖先Altair的記憶。Altair隸屬于刺客組織阿薩辛，他的師父Mualim一直在尋找伊甸園碎片，這種神器的力量是給人幻覺，從而控制人的思想。 　　UJ3紅軟基地
Altair奉師父之名陸續(xù)殺死了九名圣殿騎士，為的是阻止第三次十字軍東征，維護和平。當Altair順利殺死九名目標后，漸漸察覺到自己已被欺騙：原來，當年有十個人找到了一塊伊甸園碎片，這十人正是九名被殺的騎士和自己的師父Mualim，他之所以利用Altair刺殺掉九名騎士，只是為了一人獨吞伊甸園碎片，然后通過這個神器控制人們的思想，實現(xiàn)自己獨裁的夢想。得知這一切真相的Altair非常震驚，他火速返回刺客總部質(zhì)問自己的師父，而目的達成的師父早已不管Altair的生死，于是師徒二人展開戰(zhàn)斗，最終Altair成功殺死Mualim，得到了部分伊甸園碎片并將其埋藏，成為刺客聯(lián)盟新的首領(lǐng)。 　　返回到現(xiàn)代的Miles，同樣也得知Abstergo公司的計劃：他們想通過Miles的DNA了解到伊甸園碎片的下落，找到并利用神器控制人類的思想，其目的與當年的Mualim基本相同。Abstergo目前已經(jīng)持有部分伊甸園碎片，綁架Miles來此只是為了通過他找到當年被Altair埋葬的碎片。這個時候Abstergo的研究員Lucy也向Miles表明身份，原來她是潛伏在Abstergo公司中的間諜，她的真實身份同樣是刺客聯(lián)盟的成員，為的只是幫助Miles逃離這里。Animus的實驗結(jié)束后，Miles非常奇異的獲得了祖先的神奇能力“鷹之眼”，通過這個能力他發(fā)現(xiàn)了在實驗室休息間的秘密。原來，在他來這里之前，已經(jīng)有16位刺客后裔曾被陸續(xù)綁架來此，在實驗結(jié)束后慘遭殺害，休息間墻壁上寫滿了他們的遺言。一切結(jié)束后，Miles在Lucy的幫助下試圖逃離實驗室UJ3紅軟基地

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