這是一個(gè)關(guān)于激光共聚焦顯微鏡PPT課件，包括了激光掃描共聚焦顯微鏡成像的基本原理，激光掃描共聚焦顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)，激光掃描共聚焦顯微鏡的應(yīng)用，量子點(diǎn)技術(shù)及其在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用等內(nèi)容。激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)（Laser scanning Confocal Microscopy，簡稱LSCM）是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器的最重要發(fā)展之一，它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象，以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、免疫學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)等領(lǐng)域，對(duì)生物樣品進(jìn)行定性、定量、定時(shí)和定位研究具有很大的優(yōu)越性，為這些領(lǐng)域新一代強(qiáng)有力的研究工具，歡迎點(diǎn)擊下載激光共聚焦顯微鏡PPT課件。

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激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)（Laser scanning Confocal Microscopy，簡稱LSCM）是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器的最重要發(fā)展之一，它是在熒光顯微鏡成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見光激發(fā)熒光探針，利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象，以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞生物學(xué)、生理學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、免疫學(xué)和神經(jīng)生物學(xué)等領(lǐng)域，對(duì)生物樣品進(jìn)行定性、定量、定時(shí)和定位研究具有很大的優(yōu)越性，為這些領(lǐng)域新一代強(qiáng)有力的研究工具。 Fluorescent Microscope Confocal Principle Differences between conventional and confocal microscope 共聚焦顯微鏡的主要優(yōu)點(diǎn)高分辨率：圖像與對(duì)比度增強(qiáng)，使用短波長的紫外光，大大提高了分辯率。是普通熒光顯微鏡分辨率的1.4倍（0.51/0.37) 共聚焦顯微鏡應(yīng)用常見錯(cuò)誤認(rèn)識(shí) 在實(shí)際應(yīng)用中盡管幾乎所有標(biāo)本都采用的是熒光標(biāo)記， 但決不能將LSCM認(rèn)為就是一種“高質(zhì)量圖像的熒光顯微鏡”. 共聚焦顯微鏡并不總是熒光檢測的最好工具。 共聚焦顯微鏡能同時(shí)或序貫檢測多種熒光通道，但不能將共聚焦顯微鏡簡單地作為一種共存研究的工具。 共聚焦顯微鏡真正的威力是依賴于其強(qiáng)烈抑制焦平面外熒光信號(hào)的能力，有很好的深度分辨能力或光學(xué)切片功能�；�于該性質(zhì)的應(yīng)用包括: 樣品的顯微斷層掃描 (microscopic CT) Z掃描切片的3-D 重建厚樣品的分辨率 多通道同時(shí)檢測，可實(shí)時(shí)檢測細(xì)胞的生理活動(dòng)和形態(tài)變化: 生理學(xué)研究：如細(xì)胞內(nèi)各種離子濃度隨時(shí)間的變化情況. 活細(xì)胞多種標(biāo)記物同時(shí)進(jìn)行成像，動(dòng)態(tài)觀察不同形態(tài)學(xué)事件的發(fā)生。如分泌顆粒的分泌過程。 A confocal optical section demonstrates that during telophase， microtubules (red) form a phragmoplast(桶狀紡綞體 ) array and peroxisomes (green) aggregate immediately inside these.  The DNA in the nuclei is stained blue.  Image from Collings et al. (2003). The role of hyaluronan in renal stone disease http://www.glycoforum.gr.jp/science/hyaluronan/HA29/HA29E.html Hyaluronan is expressed by proliferating renal tubular cells in subconfluent cultures (2 days post-seeding). At cell-cell contact (4 days post-seeding) this staining starts to fade away to completely disappear when the tight junctions are assembled (5-6 days post-seeding). The hyaluronan receptor CD44 is also expressed at the luminal surface in subconfluent cultures (2 days post-seeding)， at cell-cell contact CD44 is targeted to lateral spaces， whereas at confluence (6 days post-seeding)， CD44 is exclusively expressed at basal domains of the plasma membrane. 量子點(diǎn)具有較大的斯托克位移和狹窄對(duì)稱的熒光譜 A QD-EGF binds and activates cells expressing a GFP-fused EGFR. (a) Red QD-EGF and green GFP-EGFR colocalize on the cell membrane within minutes and (b) are rapidly internalized together into endosomes in the cytoplasm. (c) Individual receptors on long sensory filaments called filopodia can be visualized by QD-EGF binding. Images are single confocal sections through living cells. Snapshots in time showing retrograde transport of QD-EGF-receptor-activated complexes on a filopodium 還可進(jìn)行脈沖追蹤實(shí)驗(yàn)(pulse-chase experiments)，觀察融合內(nèi)體的壽命. In pulse-chase experiments using two different colors of QD-EGF， binding and endocytosis of orange QD-EGF by EGFR was followed 22min later by blue QD-EGF. Few endosomes contain both colors of QDs (purple dots) when the pulses are separated by more than 15min 通過與特定蛋白質(zhì)偶聯(lián)(如螢蟲素酶)，形成生物傳感器，測定生物體內(nèi)物質(zhì)的特性 生物芯片技術(shù)：量子點(diǎn)色彩的多樣性滿足了對(duì)生物高分子（蛋白質(zhì)、DNA）所蘊(yùn)含海量信息進(jìn)行分析的要求：用量子點(diǎn)檢測腫瘤細(xì)胞小結(jié) 總的來說，由于量子點(diǎn)技術(shù)有其獨(dú)特的標(biāo)記特點(diǎn)，它必將成為今后生物分子檢測的尖端技術(shù)，為DNA 檢測(DNA 芯片) 、蛋白質(zhì)檢測(蛋白質(zhì)芯片) 和探索蛋白質(zhì)－蛋白質(zhì)之間(抗原－抗體、配體－受體、酶－底物) 反應(yīng)原理提供更先進(jìn)的方法。同時(shí)也將極大的推動(dòng)生物顯像技術(shù)和生物制藥技術(shù)的迅猛發(fā)展，給疾病的診斷和治療帶來巨大進(jìn)步。TYB紅軟基地

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