真菌的微生物學檢查法課件ppt下載

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素材類別：: 生物課件PPT

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這是真菌的微生物學檢查法課件ppt，包括了與醫(yī)學有關的有4個亞門，接合菌（Zygomycotina），接合菌（Zygomycotina）所致疾病，子囊菌亞門（Ascomycotina）等內(nèi)容，歡迎點擊下載。

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真菌h34紅軟基地

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第三十六章真菌

是一大類具有細胞壁和典型細胞核、不含葉綠素、不分根、莖、葉的真核細胞型微生物。細胞分化程度高，細胞器完整，大部分為多細胞，少數(shù)為單細胞結(jié)構(gòu)，分布廣、種類多，多數(shù)無害，有的有益，少數(shù)有害，引起感染、中毒、超敏反應。

與醫(yī)學有關的有4個亞門

1、接合菌亞門：機會致病性真菌，如毛霉菌、

根霉菌

2、子囊菌亞門：如芽生菌屬、組織胞漿菌屬、

毛癬菌屬、酵母菌屬

3、擔子菌亞門：食用菌如蘑菇、靈芝、新生隱

球菌

4、半知菌亞門：球孢子菌屬、白假絲酵母菌

接合菌（Zygomycotina）

子囊菌亞門（Ascomycotina）

擔子菌（Basidiomycotina）

半知菌（Deutemycotina）

一、真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu)

形態(tài)多種多樣，大小不一。比細菌大的多。小的如白假絲酵母菌，大的如蘑菇、木耳。

（一）單細胞真菌

1、酵母型～：由母細胞以芽生方式繁殖，菌落似細菌，細胞圓形、橢圓形、圓柱形。5～30µm×3～5µm。

2、類酵母菌～：芽生方式繁殖，可形成假菌絲。

單細胞真菌

呈圓形或橢圓形，不產(chǎn)生

菌絲，有假菌絲聯(lián)結(jié)在一

起的假菌絲體

（二）多細胞真菌

1、菌絲：孢子出芽形成芽管，延長呈絲狀即菌絲，橫徑約5～6 µm，長出分枝，交織成團形成菌絲體。

有隔菌絲/無隔菌絲:病原性真菌多為有隔菌絲。

營養(yǎng)菌絲：長入培養(yǎng)基中的菌絲。

氣中（生）菌絲：露出培養(yǎng)基表面的菌絲。其中可以產(chǎn)生孢子的菌絲稱為生殖菌絲。

2、孢子（spore）

真菌的生殖結(jié)構(gòu)，由生殖菌絲生成。大多數(shù)真菌通過有性或無性孢子繁殖。病原性真菌多產(chǎn)生無性孢子。

（1）葉狀孢子：菌絲直接形成。

芽生孢子

關節(jié)孢子

厚膜孢子

（2）分生孢子：菌絲或其分枝后的結(jié)構(gòu)頂端或側(cè)面直接形成。

大分生孢子

小分生孢子

（3）孢子囊孢子：菌絲末端形成孢子囊，內(nèi)有許多孢子。孢子成熟后則破囊而出，如毛霉菌、根霉菌。

1）無性孢子

（1）葉狀孢子：菌絲直接形成。

芽生孢子

關節(jié)孢子

厚膜孢子

（2）分生孢子：菌絲或其分枝后的結(jié)構(gòu)頂端或側(cè)面直接形成。大分生孢子小分生孢子

（3）孢子囊孢子：菌絲末端形成孢子囊，內(nèi)有許多孢子。孢子成熟后則破囊而出，如毛霉菌、根霉菌。

2）有性孢子

是由細胞間配合（質(zhì)配和核配）后產(chǎn)生的孢子，有接合孢子、子囊孢子、擔子孢子。有性孢子絕大多數(shù)為非致病性真菌所具有。

多細胞真菌

菌絲（hypha）

孢子（Spore）

真菌無性孢子的形態(tài)

二、真菌的培養(yǎng)

（一）真菌的繁殖方式無性生殖、有性生殖。無性生殖是指不經(jīng)過兩性細胞的結(jié)合便產(chǎn)生新的個體。無性繁殖是真菌的主要繁殖方式。

（二）真菌的培養(yǎng)

培養(yǎng)特點：低營養(yǎng)、低溫度（淺部）22-28℃、低PH(4.0-6.0)、高濕度和氧 “三低兩高”

（二）真菌的培養(yǎng)

1.最常用的培養(yǎng)

沙保弱培養(yǎng)基（Sabouraud‘s glucose agar）

4% malt extract agar

2.溫度

多數(shù)都在22 ~ 28oC，但深部感染真菌最適溫度為37oC

3.酸堿度：pH4.0 ~ 6.0

4.病原菌通常生長緩慢，1~4周

沙保弱培養(yǎng)基成分：

葡萄糖 20g

蛋白胨 5g

瓊脂 10g

蒸餾水 500ml

5.三種菌落

酵母型：單細胞菌落，有芽生孢子，無菌絲。

類酵母型菌落：可見假菌絲。

絲狀型菌落：多細胞真菌。

真菌菌落的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和顏色可作為鑒定真菌的參考

真菌菌落

酵母型菌落（yeast colony）

菌落光滑、濕潤。無菌絲

隱球菌菌落

類酵母型菌落（yeast-like colony）

外觀和酵母型菌落相似，顯微鏡下可看到假菌絲

白色念株菌菌落

絲狀型菌落（filamentous colony）

菌落系由多細胞菌絲體所組成

大多數(shù)絲狀真菌或霉菌的菌落

三、變異性與抵抗力

對干燥、陽光、紫外線及常用消毒劑有強抵抗力

不耐熱，菌絲與孢子60℃ 1小時均可被殺死

對2﹪石炭酸、10%甲醛、0.1%升汞和2.5%碘酊敏感

對常用于抗細菌的抗生素不敏感

灰黃霉素、制霉菌素B、二性霉素B、氟康唑和酮康唑等抗真菌藥物對多種真菌均有抑制作用

不同的真菌可通過下列幾種形式致病：　　1.致病性真菌感染。　　2.條件致病性真菌感染。　　3.真菌超敏反應性疾病。　　4.真菌性中毒癥。　　5.真菌毒素與腫瘤的關系。

一、真菌致病性

2、條件致病性真菌感染：內(nèi)源性真菌感染致病性弱，只有在機體免疫力降低時引起感染

內(nèi)源性真菌感染多見于長期大量使用廣譜抗生素、皮質(zhì)激素、放療或?qū)Ч芙槿�、手術(shù)等過程易于發(fā)生

腫瘤、白血病、糖尿病、免疫缺陷病

第三節(jié) 真菌的微生物學檢查法

標本

淺部感染真菌毛發(fā)、皮屑、指甲

深部感染真菌痰、血液、腦脊液等

直接鏡檢：

淺部標本---KOH處理后鏡檢

假絲酵母菌---革蘭染色（假菌絲、厚膜孢子）

隱球菌---墨汁負染（厚莢膜）

其他多細胞真菌----特殊染色鏡檢

分離培養(yǎng)

血清學檢查

核酸檢測

小結(jié)：真菌與細菌的比較

第37章主要病原性真菌

真菌按其侵犯的部位和臨床表現(xiàn)，可分為淺部感染真菌、深部感染真菌和條件致病性真菌。

第一節(jié) 淺部感染真菌

一、表面感染真菌　　這類真菌主要寄居于人體皮膚和毛干的最表層。因不接觸組織細胞，很少引起宿主細胞反應。這類真菌在我國主要有秕糠馬拉癬菌(Malasseziafurfur)，可引起皮膚表面出現(xiàn)黃褐色的花斑癬，如汗?jié)n斑點，俗稱汗斑。此菌具嗜脂性。有報道從92%正常人頭皮、軀干、面部、四肢等部位分離出。誘發(fā)因素為高溫多汗。由于此菌能產(chǎn)生對黑色素細胞有抑制作用的二羧酸，使花斑癬局部色素減退。此菌有粗短、分枝的有隔菌絲和成叢的酵母樣細胞�；颊咂つw用Wood燈紫外線波長365nm照射或刮取鱗屑照射，能發(fā)出金黃色熒光，有助于診斷。

二、皮膚癬真菌

引起皮膚淺部感染的真菌主要是一些皮膚癬菌(dermatophytes)。皮膚癬菌有嗜角質(zhì)蛋白的特性，使其侵犯部位只限于角化的表皮、毛發(fā)和指（趾）甲，而病理變化是由真菌的增殖及其代謝產(chǎn)物剌激宿主引起的反應。皮膚癬，特別是手足癬是人類最多見的真菌病。皮膚癬菌分毛癬菌(Tricho-phyton)、表皮癬菌（Epidermophyton)和小孢子癬菌(Microsporum)3個屬。

（一）生物學性狀　

　皮膚癬菌可在沙保培養(yǎng)基上生長，形成絲狀菌落。根據(jù)菌落形態(tài)、顏色和所產(chǎn)生的大分生孢子，可對皮膚癬菌作出初步鑒定

（二）皮膚癬真菌的致病性

一種皮膚癬菌可在不同部位引起病變，相同部位的病變也可由不同的皮膚癬菌引起。3種癬菌均可侵犯皮膚，引起手足癬、體癬、股癬、疊瓦癬等。毛癬菌和表皮癬菌可侵犯指（趾）甲，引起甲癬（俗稱灰指甲），使指甲失去光澤，增厚變形。此外，毛癬菌與小孢子癬菌還可侵犯毛發(fā)，引起頭癬、黃癬和須癬

三、皮下組織真菌感染

引起皮下組織感染的真菌主要有著色真菌和孢子絲菌。感染常發(fā)生于真菌侵入的外傷部位。感染最初發(fā)生于真皮深層、皮下組織或骨，逐漸擴展，最后可達到皮表下。感染一般只限于局部，但也可緩慢擴散至周圍組織。

（一）孢子絲菌

孢子絲菌屬于腐生性真菌，廣泛存在于土壤、植物、木材上，常因外傷接觸帶菌的花草、荊棘等引起感染。感染的主要病原為申克孢子絲菌。

孢子絲菌致病性

致病性：

1.孢子絲菌可經(jīng)微小損傷侵入皮膚，然后沿淋巴管分布，引起亞急性或慢性肉芽腫，使淋巴管形成鏈狀硬結(jié)，稱為孢子絲菌下疳。

2.此菌也可經(jīng)口進入腸道或經(jīng)呼吸道進入肺，隨后經(jīng)血行播散至其他器官引起深部感染。

（二）著色真菌

是一些在分類上接近、引起的疾病癥狀近似的真菌的總稱。感染都發(fā)生在暴露部位，病損皮膚變黑，故稱著色真菌病(chromomycosis)。

在我國主要有卡氏枝孢霉和裴氏著色芽生菌

著色真菌的分生孢子有3型：①樹枝型；②劍頂型；③花瓶型。

著色真菌致病性

在人體主要侵犯肢體皮膚。潛伏期約一個多月，長者數(shù)月乃至1年。病程可長達幾十年。早期皮膚患處發(fā)生丘疹，丘疹增大形成結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)融合成疣狀或菜花狀。隨病情發(fā)展，原病灶結(jié)疤愈合，新灶又在四周產(chǎn)生。日久疤痕廣泛，影響淋巴回流，形成肢體象皮腫。免疫功能低下時亦可侵犯中樞神經(jīng)，或經(jīng)血行擴散。

三、地方性流行真菌

這些真菌均屬二相性，對環(huán)境溫度敏感。一般在體內(nèi)或37℃培養(yǎng)時呈酵母型，在室溫下人工培養(yǎng)變?yōu)榻z狀型。

1.莢膜組織胞漿菌

2. 厭酷球孢子菌

3. 皮炎芽生菌

1.莢膜組織胞漿菌(Histoplasmacapsulatum)　　標本在油鏡下檢查可見單核細胞或中性粒細胞中有圓形或卵圓形的酵母型細胞（直徑1~5μm)。以出芽繁殖，四周有不著色的莢膜樣物質(zhì)。在沙保培養(yǎng)基上室溫下生長緩慢，形成白色棉絮樣菌落，逐漸從黃色轉(zhuǎn)變?yōu)楹稚�。鏡檢可見細長有隔菌絲，在菌絲側(cè)面或孢子柄上長有特殊的圓形大分生孢子(8~15μm)，厚壁，四周有棘突，排列如齒輪，這種孢子有診斷價值。

2.厭酷球孢子菌：鏡檢可見有較大的厚壁球孢子(20~80μm)，內(nèi)含許多內(nèi)生孢子(2~6μm)，厚壁破裂則內(nèi)生孢子逸出。在沙保培養(yǎng)基上生長迅速，開始為白色菌落，很快變?yōu)樽攸S色棉絮樣菌落。鏡下見有大量關節(jié)孢子。

3.皮炎芽生菌：鏡下可見細胞呈酵母型，均以出芽繁殖。二者的區(qū)別是皮炎芽生菌每1個細胞僅出1個芽，

第二節(jié) 深部真菌感染

條件致病性真菌感染多為內(nèi)源性，如假絲酵母菌病和曲霉病等。這類真菌致病性不強，大多在久病體弱、免疫力低下或在菌群失調(diào)時發(fā)生，如腫瘤、糖尿病、器官移植及HIV患者、長期使用廣譜抗生素、放療、化療等過程中易伴這類真菌感染。其致病性雖弱，不及時診治亦可危及生命。

3.曲霉

廣布自然界，生長迅速，在沙保培養(yǎng)基上形成絲狀菌落。開始為白色隨著分生孢子的產(chǎn)生而呈各種顏色。引起人類致病最多見的為煙曲霉(A.fumingatus)，主要由呼吸道入侵，引起支氣管哮喘或肺部感染。

4.毛霉

特征是一般只有無隔菌絲、分枝成直角、無性生殖、產(chǎn)生孢子囊和孢子囊孢子。

此菌一般為面包、水果上和土壤中的腐生菌。

在機體免疫力低下或醫(yī)源性輸液和污染的繃帶等可導致感染，大多數(shù)發(fā)展急劇，可累及腦、肺和胃腸道等多個器官。好侵犯血管，形成栓塞，死亡率較高。

5.卡氏肺孢菌

生物學特性與一般真菌有些不同，可分幾個階段：最初為營養(yǎng)型，呈單核的孢子囊(4~5μm);成熟的孢子囊(5.0μm)內(nèi)含8個球狀、卵圓狀或梭狀孢子;孢子囊成熟后破裂，釋放出其中的孢子。

卡氏肺孢菌廣布于自然界，可引起健康人的亞臨床感染。但對一些先天免疫缺陷或因各種原因受到免疫抑制的患者，可引起肺炎。

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