這是藥物分析第五章ppt，包括了常用體內(nèi)樣品的制備與貯藏，體內(nèi)樣品分析的處理，體內(nèi)樣品分析方法與方法驗證，典型體內(nèi)藥物分析應(yīng)用等內(nèi)容，歡迎點擊下載。

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概述 第一節(jié)常用體內(nèi)樣品的制備與儲存 一、體內(nèi)樣品的種類 二、體內(nèi)樣品的采集與制備 三、體內(nèi)樣品的儲存與處理 第二節(jié)體內(nèi)樣品處理 一、體內(nèi)樣品處理的目的 二、常用體內(nèi)樣品處理方法 （一）去除蛋白質(zhì)法 （二）分離與濃集法 1. 液相萃取法 （1）溶劑的選取原則 （2）溶劑的用量 2. 固相萃取法 （1）固相萃取法的原理 （2）固相萃取法操作步驟 （3）注意事項 （4）固相萃取法的特點 （5）自動化固相萃取法 柱切換： 固相萃取-LC/MS/MS 3. 超濾法 （三）綴合物水解法 （四）化學(xué)衍生化法 第三節(jié)體內(nèi)樣品分析方法與方法驗證 一、分析方法的建立 （一）分析方法的選擇 （二）分析方法建立的一般程序 二、分析方法的驗證 （一）選擇性 （二）標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量范圍 （三）定量下限 （四）精密度與準(zhǔn)確度 （五）穩(wěn)定性 （六）提取回收率 （七）基質(zhì)效應(yīng) （八）試驗樣品分析 （九）試驗樣品濃度超出定量范圍的處理 （十）作為外源性藥物使用的內(nèi)源性物質(zhì)的測定 （十一）微生物學(xué)/免疫學(xué)方法的驗證 （十二）名詞解釋1 （十三）名詞解釋2 （十四）名詞解釋3 第四節(jié)典型體內(nèi)藥物分析應(yīng)用 氨氯地平 新型二氫吡啶類長效鈣通道阻滯藥，臨床上主要用于治療高血壓和心絞痛 氨氯地平分子結(jié)構(gòu)中含有一個手性碳原子，故具有一對光學(xué)異構(gòu)體R-（+）-氨氯地平與S-（-）-氨氯地平 僅S-（-）-氨氯地平具有血管擴張作用 因此需進(jìn)行血漿中氨氯地平對映體的手性分離與立體選擇性藥動學(xué)研究 色譜條件 色譜柱Chiralcel OJ RH柱（150mm × 4.6mm， 3.5μm）；流動相乙腈-0.2%氨的水溶液 （80︰20，v/v）；流速1.0ml/min；進(jìn)樣10µl 質(zhì)譜條件 離子化方式，電噴霧（ESI）離子源；電離模式，正離子；掃描方式，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。氨氯地平和氨氯地平-d4（內(nèi)標(biāo)物）的母/子離子對的質(zhì)荷比（m/z）分別為409.2→238.1和413.2→238.1 方法學(xué)驗證 選擇性：在實驗條件下兩對映體色譜峰達(dá)基線分離，內(nèi)源性物質(zhì)不干擾測定 藥物動力學(xué)結(jié)果 采用非房室模型方法計算獲得藥物動力學(xué)參數(shù) R-/S-氨氯地平Cmax分別為（2.72±1.16）和（3.82±1.38）ng/ml Tmax分別為（8.70±1.64）和（9.70±2.21）小時 AUC0-t分別為（107±48.8）和（169±59.7）ng · h/ml t1/2分別為（39.9±7.23）和（52.8±13.6）小時 二、替諾福韋雙特戊酯的體內(nèi)藥動學(xué)及其對左卡尼汀血藥濃度的影響 替諾福韋（tenofovir） 開環(huán)核苷磷酸類化合物 新型核苷酸類逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，具有抗HIV-1和乙肝病毒活性，但其生物利用度較低 富馬酸替諾福韋二吡呋酯 替諾福韋的前藥，生物利用度相對較高，已于2001年在美國批準(zhǔn)上市 富馬酸替諾福韋雙特戊酯（tenofovir dipivoxil fumarate） 結(jié)構(gòu)修飾物，具有我國自主知識產(chǎn)權(quán) 該藥已獲CFDA頒發(fā)的藥物臨床試驗批件。Ⅰ期臨床試驗中，評價人體對于該藥的耐受程度和藥代動力學(xué)，為制訂給藥方案提供依據(jù) 試驗設(shè)計與給藥方法 受試者禁食12小時后，早晨空腹給藥，用250ml溫開水吞服富馬酸替諾福韋雙特戊酯片150、300和600mg 受試者口服藥物前和服藥后10、20、30、45分鐘，1、1.5、2、3、5、8、12、24、36、48、72小時后各抽取血樣5ml，然后立即離心獲得血漿樣品（試驗樣品），并將血漿樣品于-20℃保存 色譜與質(zhì)譜條件 色譜柱采用Inertsil ODS-3 （150mm × 4.6mm， 5μm），甲醇（A）-0.2%冰醋酸溶液（B）為流動相，梯度洗脫，0分鐘 （5%A）-0.8分鐘 （5%A）-1分鐘 （95%A）-4分鐘 （95%A）-4.1分鐘 （5%A）-5.5分鐘 （5%A）；流速1.0ml/min。ESI正離子模式，MRM檢測；毛細(xì)管電壓 3.5kV；溫度350℃；脫溶劑氣600L/Hr；裂解電壓，替諾福韋（130V），恩替卡韋（120V）；碰撞能量，替諾福韋（23eV），恩替卡韋（17eV）；樣品檢測：替諾福韋母離子 m/z288.1，子離子m/z176.0；內(nèi)標(biāo)檢測：恩替卡韋母離子m/z278.1，子離子m/z152.0 方法學(xué)驗證 選擇性：替諾福韋的保留時間約為3.50分鐘，內(nèi)標(biāo)恩替卡韋的保留時間約為3.50分鐘，空白血漿樣品在分析物保留時間無干擾 定量范圍：替諾福韋在2～1200ng/ml范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好（r=0.9984） 定量下限：為2ng/ml 提取回收率：內(nèi)標(biāo)和不同濃度質(zhì)控樣品回收率均大于50% 準(zhǔn)確度和精密度：準(zhǔn)確度在92%～108%之間，各項精密度實驗結(jié)果RSD均小于5% 藥物動力學(xué)結(jié)果 藥物動力學(xué)參數(shù)經(jīng)非房室模型計算。受試者口服低、中、高三個劑量富馬酸替諾福韋雙特戊酯片后，隨著劑量的增加，Cmax和AUC成比例增加（r﹥0.99）。 在口服富馬酸替諾福韋雙特戊酯150～160mg劑量范圍內(nèi)，替諾福韋在人體內(nèi)呈現(xiàn)線性藥物動力學(xué)特征。 左卡尼汀 哺乳動物能量代謝中必需的體內(nèi)天然物質(zhì)，能夠促進(jìn)脂類代謝 體內(nèi)缺乏可能引起脂肪代謝紊亂、骨骼肌和心肌等組織的功能障礙 長期服用福韋酯（dipivoxil）類化合物（如阿德福韋酯、替諾福韋雙特戊酯等），可能加速左卡尼汀在人體內(nèi)的消除，導(dǎo)致左卡尼汀在人體內(nèi)缺乏 為聯(lián)合應(yīng)用替諾福韋雙特戊酯和左卡尼汀，有必要對人體內(nèi)左卡尼汀血藥濃度進(jìn)行監(jiān)測 試驗設(shè)計與給藥方法 低劑量、中劑量和高劑量分別單次口服富馬酸替諾福韋雙特戊酯片150、300和600mg。受試者口服藥物前和服藥后8、15、30、45分鐘，1、1.5、2、3、5、8、12、24、36、48、72小時后抽取血樣4ml，3000 ×g離心10分鐘，血漿于-80℃保存。中劑量300mg，連續(xù)給藥14天，每日一次。在第14天給藥后，按照單次給藥試驗抽取4ml血樣、離心和保存 色譜條件 色譜分離采用DIKMA Spursil C18-EP柱 （150mm × 4.6mm， 5μm），柱溫40℃，0.1%甲酸的乙腈溶液-10mol/L醋酸銨（70︰30，v/v）溶液流動相，流速0.7ml/min 血漿樣品處理 40μl內(nèi)標(biāo)工作溶液（托特羅定 50μg/ml）加到0.2ml血漿中，渦旋，加0.4ml乙腈，渦旋，高速離心10分鐘，取10μl上清液，加5ml流動相稀釋，進(jìn)樣分析。左卡尼汀保留時間為5.3分鐘 左卡尼汀單次給藥150、300和600mg后，左卡尼汀的血藥濃度與正常水平相比分別降低27%、48%和60%dIJ紅軟基地

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