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淺談分光光度法-- 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作與應(yīng)用 一.相關(guān)名稱簡介 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 邊清鵬 16.05.01 一.相關(guān)名稱簡介 1 分光光度法 分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。光區(qū)包括：紫外光區(qū)（200～400nm）、可見光區(qū)（400～760nm）、紅外光區(qū)（0.8-100 um）。 一.相關(guān)名稱簡介 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線定義 標(biāo)準(zhǔn)曲線是標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的物理/化學(xué)屬性跟儀器響應(yīng)之間的函數(shù)關(guān)系。建立標(biāo)準(zhǔn)曲線的目的是推導(dǎo)待測物質(zhì)的理化屬性。 在分析化學(xué)實驗中，常用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析，通常情況下的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線是一條直線。 一.相關(guān)名稱簡介 3 坐標(biāo) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的橫坐標(biāo)(X)表示可以精確測量的變量(如標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度)，稱為普通變量，縱坐標(biāo)(Y)表示儀器的響應(yīng)值(也稱測量值，如吸光度、電極電位等)，稱為隨機(jī)變量。當(dāng)X取值為X1， X2，…Xn時，儀器測得的Y值分別為Y1， Y2， …Yn。 一.相關(guān)名稱簡介 將這些測量點Xi， Yi描繪在坐標(biāo)系中，用直尺繪出一條表示X與Y之間的直線線性關(guān)系，這就是常用的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法。用作繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它的含量范圍應(yīng)包括試樣中被測物質(zhì)的含量，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線實驗點7個較好，不能任意延長。 一.相關(guān)名稱簡介 4 點分布 從不確定度理論推算樣本的不確定度時，有二個重要的結(jié)論：一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的重心點處，所查出來的樣品不確定度最小。二、標(biāo)準(zhǔn)的點數(shù)越多，樣品的不確定度越小。基于這兩個結(jié)論的標(biāo)準(zhǔn)曲線的做法應(yīng)該是：在樣品濃度的附近盡量的多布標(biāo)準(zhǔn)點。 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的表達(dá)式 標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)是一條通過原點的直線 ，如果坐標(biāo)上各濃度點基本在一條直線上可不進(jìn)行回歸處理 ，但在實驗中不可避免地存在測定誤差 ，往往會有一、二點偏離直線 ，此時可用最小二乘法進(jìn)行回歸分析 ， 然后繪制曲線 ，通常稱為回歸直線 ，而代表回 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 歸直線方程叫回歸方程 ，表達(dá)式為 : y = kx + b (式中 : k為直線斜率， b為 y 軸上的截距 ， x 為被測溶液的濃度， y 為吸光度 ， 是多次測定結(jié)果的平均值 ) 。 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的參數(shù) 標(biāo)準(zhǔn)曲線有 3個參數(shù) ， 即相關(guān)系數(shù) r， 斜率 k和截距 b。 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 2.1 相關(guān)系數(shù) (r) :相關(guān)系數(shù)是表示變量 x 與 y 之間的線性關(guān)系的密切程度。如果 r = 1 則所有點都落在一條直線上， y 與 x完全呈現(xiàn)線性關(guān)系 ， 在分析中總存在隨機(jī)誤差， 一般， r≥0. 999。 2.2 斜率 (k) :某種分析方法的斜率在實驗條件基本一致的情況下是相對穩(wěn)定的 ，斜率是檢驗分析方法靈敏度的 ，因此當(dāng)斜 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 率出現(xiàn)異常數(shù)據(jù) (超過相當(dāng)偏差的2.5%)時 ，就要尋找原因。 2.3 截距 (b) :截距是評價標(biāo)準(zhǔn)曲線準(zhǔn)確度的 ， 是實驗誤差在 y軸上 (或 x軸上 )的反映， 當(dāng)用扣除空白值吸光度的數(shù)值為 y 值進(jìn)行回歸時 ， 理論上 b 值應(yīng)為零 ， 但實際上截距等于零的情況是很罕見的 ， 當(dāng)系統(tǒng)誤差減至允許程度后， 隨機(jī)誤差總是存 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 在的 ， 因此截距一般不為零。 3 影響標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系的因素 （1）分析法自身的精密度 （2）測定用儀器的精密度（3）易揮發(fā)的溶劑所引起的測定溶液濃度的改變（4）污染 （5）分析人員操作的影響 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 玉米漿中溶磷標(biāo)準(zhǔn)曲線 二.標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 玉米漿中溶磷標(biāo)準(zhǔn)曲線 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 總砷標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 總砷標(biāo)準(zhǔn)曲線應(yīng)用表格 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 1 實用性 這是做標(biāo)準(zhǔn)曲線的重要前提，這個問題實際很簡單，就是這樣一個問題：我的樣品的儀器響應(yīng)能否用我們所建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線來推導(dǎo)其理化屬性？答案建立在儀器響應(yīng)的特異性和標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品的匹配性上面。一方面我們總是力求儀器 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 1 實用性 的響應(yīng)對于標(biāo)準(zhǔn)和樣品是一視同仁；同時我們也要求我的樣本跟標(biāo)準(zhǔn)基體匹配。所以最好的標(biāo)準(zhǔn)是基體匹配標(biāo)準(zhǔn)，最好的標(biāo)準(zhǔn)曲線是工作曲線。 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 2 現(xiàn)實 現(xiàn)有方法趨向于標(biāo)準(zhǔn)曲線適用于較寬的樣品濃度范圍。在較寬的濃度跨度和有限的標(biāo)準(zhǔn)點的情況下，均勻的分布濃度點是最佳選擇，這樣對該標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋的濃度范圍內(nèi)，對于所有的濃度所提供的信息量都是相同的。奇數(shù)點的設(shè)置來 三.相關(guān)曲線及應(yīng)用 源于相關(guān)信息，在已知該濃度范圍先確定中間點，然后在中間點左右分布對稱的標(biāo)準(zhǔn)曲線點，所以出來的總是奇數(shù)個點。正如強(qiáng)調(diào)，點多點少，最后影響的是標(biāo)準(zhǔn)曲線所查出樣品理化屬性的不確定度，不確定度是否符合要求呢，這就是在判斷樣品的結(jié)果是否超標(biāo)或符合限值的時候有重要意義了。 Thanks!Hhs紅軟基地

物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞角�線圖介紹PPT：這一個關(guān)于物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞角�線圖介紹PPT，自由擴(kuò)散的特點；協(xié)助擴(kuò)散的特點；主動運輸?shù)奶攸c；主動運輸?shù)囊饬x；物質(zhì)跨膜運輸三種方式的比較；大分子出入細(xì)胞的方式；胞吞和胞吐。有氧呼吸和無氧呼吸都可以為主動運輸提供能量，因此，氧氣濃度為0時，可由無氧呼吸為其提供能量，故橫坐標(biāo)為氧分壓時曲線的起點不在原點。胞吞和胞吐不是跨膜運輸 (1)跨膜運輸包括主動運輸(轉(zhuǎn)運)和被動運輸(轉(zhuǎn)運)，是由物質(zhì)直接穿過細(xì)胞膜完成的，是小分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)運輸方式，其動力來自于物質(zhì)濃度差或ATP。(2)胞吞(內(nèi)吞)和胞吐(外排)是借助于膜的融合完成的，與膜的流動性有關(guān)；是大分子和顆粒物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的物質(zhì)運輸方式，靠ATP提供動力，歡迎點擊下載物質(zhì)跨膜運輸?shù)姆绞角�線圖介紹PPT哦。

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