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診斷酶學(xué) 目的與要求 掌握：血清酶變化的病理生理機(jī)制； 臨床診斷中常用的血清酶類及其同工酶。 熟悉：缺血性冠狀動脈和肝膽疾病的酶學(xué)診斷。 了解：血清酶的分類。 一、概述 什么是酶？ 一類由活細(xì)胞產(chǎn)生，催化效率高、特異性強(qiáng)的生物催化劑。 為什么學(xué)習(xí)有關(guān)酶的知識？ （一）診斷酶學(xué)的發(fā)展簡史 20世紀(jì)初臨床就開始測定體液中的酶 1908年測尿AMY活力——診斷急性胰腺炎 30年代ALP用于診斷骨骼疾病 診斷酶學(xué)的真正發(fā)展從50年代用分光光度法建立了連續(xù)監(jiān)測酶活性方法開始 70年代開始起，逐步將注意力集中到同工酶測定上，又隨免疫學(xué)和技術(shù)方法的開展，用抗原抗體反應(yīng)有可能直接測定微量的酶蛋白。 （二）廣泛利用酶診斷的原因 1. 測定酶活力的方法靈敏度、準(zhǔn)確性較好； 2. 酶活力的變化早于臨床體征或其他診斷指標(biāo) （三）診斷酶學(xué)的作用： 各種疾病的診斷、預(yù)后和隨訪觀察 二、血清酶的分類 （一）血清（漿）特異酶：在血清（漿）中發(fā)揮催化作用的酶類，有明確的生理功能，含量高于其他組織。 （二）非特異的血漿酶：在血中不起任何生理作用，濃度明顯低于組織和細(xì)胞中含量。 Ⅰ. 外分泌酶：血清中來源于外分泌腺的酶。 Ⅱ.細(xì)胞酶：存在于機(jī)體各種組織細(xì)胞中進(jìn)行物質(zhì)代謝的酶類。 三、血清酶變化的病理生理機(jī)制 （一）細(xì)胞酶的釋放 Ⅰ. 細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異 Ⅱ.酶在細(xì)胞內(nèi)定位與存在形式 Ⅲ.酶蛋白分子量的大小 （二）酶在細(xì)胞外間隙的分布和運(yùn)送 細(xì)胞中的酶經(jīng)過三種途徑進(jìn)入血液： 直接進(jìn)入血液； 既和組織間隙也和血液直接相接觸； 大部分進(jìn)入組織液，經(jīng)淋巴系統(tǒng)入血。 （三）血中酶的清除 一般以血中酶的半壽期代表酶從血中清除快慢。 （四）酶合成異常 對于血漿特異酶，細(xì)胞內(nèi)酶合成下降是引起血中酶變化的重要因素。 （五）其它 抑制劑和活化劑 四、血清酶的生理變異 （一）性別 （二）年齡 （三）進(jìn)食 （四）運(yùn)動 （五）妊娠與分娩 五、測定方法、標(biāo)本處理等對測定結(jié)果的影響 （一）酶測定方法及條件 固定時間法 連續(xù)監(jiān)測法 平衡法 免疫學(xué)方法 1、固定時間法（兩點(diǎn)法） 測定反應(yīng)開始后某一時間內(nèi)（t1到t2）產(chǎn)物或底物濃度的總變化量來求取酶反應(yīng)初速度的方法。 特點(diǎn)：需加終止劑； 應(yīng)做預(yù)試驗確定線性時間； 比色計或分光光度計無需保溫裝置。 2、連續(xù)監(jiān)測法（動力學(xué)法或速率法） 連續(xù)測定（每15s-20min監(jiān)測一次）酶反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間的變化來求出酶反應(yīng)初速度的方法。 特點(diǎn)：結(jié)果準(zhǔn)確； 無需終止反應(yīng)； 儀器必須有保溫裝置； 產(chǎn)物或底物應(yīng)是可直接測定的化合物。 3、平衡法（終點(diǎn)法） 通過測定酶反應(yīng)開始至反應(yīng)達(dá)到平衡時產(chǎn)物或底物濃度總變化量來求出酶活力的方法。 特點(diǎn)：無需終止反應(yīng)； 反應(yīng)時間長，影響因素多； 適合零級反應(yīng)期很短的酶促反應(yīng)。 酶單位：反映在某一特定條件下使酶促反應(yīng) 達(dá)到某一速度所需要的酶量。 慣用單位 國際單位（IU）：每分鐘能催化1微摩爾 底物的酶量為1個國際單位。 Katal單位：在確定的最適反應(yīng)條件下每秒鐘催化一個摩爾底物變化所需要的酶量。 （二）標(biāo)本的采集、處理與貯存 1. 體外溶血 2. 一般采用血清標(biāo)本 3. 酶蛋白不穩(wěn)定，易失活 六、疾病時血清酶活力改變的機(jī)制 （一）酶合成異常 1. 合成減少：肝功能損傷 2. 合成增多：惡性腫瘤 （二）酶從損傷細(xì)胞中釋放增加 疾病時大多數(shù)血清酶增高的主要機(jī)理。 主要原因： 缺氧 能量供應(yīng)缺乏 酶的分子量越小，從細(xì)胞內(nèi)釋出的速度越快。 （三）缺血 （四）炎癥 （五）壞死 （六）腫瘤 七、血清酶的選擇原則： 可靠、可行的測定方法 特異性、靈敏度高——明確診斷和早期診斷 八、血清酶測定在臨床診斷中應(yīng)用 Ⅰ.肝細(xì)胞損傷的酶類 1.轉(zhuǎn)氨酶——丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST） （1）分布特點(diǎn) AST含量多少順序：心臟、肝、骨骼肌、腎 ALT含量多少順序：肝、腎、心、骨骼肌 （2）在各類肝細(xì)胞疾病中的變化 ALT主要存在于細(xì)胞質(zhì)中； AST主要存在于線粒體中； 病毒性肝炎：ALT AST 重癥肝炎： ALT AST 肝硬化： ALT輕度增高， AST增高程度常超過ALT 2. 谷氨酸脫氫酶（GLDH） 分布：肝細(xì)胞含量最豐富 臨床意義：肝小葉中央?yún)^(qū)壞死指標(biāo)（四氯化 碳中毒，轉(zhuǎn)氨酶/GLDH ） 酒精性肝損傷診斷 3. 山梨醇脫氫酶（SDH） 含量 主要反映肝膽系統(tǒng)的病變 特異性好，靈敏度和陽性率較差 4. 膽堿酯酶（ChE） 由肝臟合成分泌入血，是肝臟合成蛋白質(zhì)功能的指標(biāo) 肝病時，ChE合成下降，血清ChE Ⅱ.膽道梗阻的酶類 1.堿性磷酸酶（ALP） 阻塞性黃疸病人血清ALP活性升高 完全梗阻》不完全梗阻 肝外阻塞》肝內(nèi)阻塞 癌性梗阻》良性梗阻 2. -谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（-GT） 膽管梗阻的指標(biāo)，靈敏度及陽性率優(yōu)于ALP 3. 5'-核苷酸酶（5'-NT） Ⅲ. 肝纖維化的酶——單氨氧化酶（MAO） Ⅳ.　心肌梗死的血清酶 ⒉ AST、LDH、CK同工酶 ① AST同工酶 c-AST——細(xì)胞質(zhì) m-AST——線粒體 ② LDH同工酶 （1）類型 （2）正常與疾病時的特點(diǎn) 正常血清：LDH2＞LDH1＞LDH3＞LDH4＞LDH5 心梗：LDH1＞LDH2＞LDH3＞LDH4＞LDH5 ③CK同工酶 (1). 類型 肌酸激酶（CK）亞基及其同工酶 (2). CK-MB對診斷心梗的特異性高 Ⅴ.　胰腺疾病的血清酶 ——-淀粉酶（AMY） 急性胰腺炎：2-12小時 AMY明顯 12-72小時 達(dá)到高峰 持續(xù)3-4天，一周內(nèi)恢復(fù) Ⅵ.　骨骼疾病的血清酶 ——堿性磷酸酶（ALP） 1.分布：骨骼、肝、腎等 2.ALP熱滅活試驗Met紅軟基地

酶學(xué)檢測PPT課件：這是一個關(guān)于酶學(xué)檢測PPT課件，主要介紹了酶含量增高的原因；淀粉酶；血清肌酸激酶；乳酸脫氫酶，酶學(xué)檢查酶含量增高的原因： 1.炎癥 2.腫瘤 3.排泄管道受阻淀粉酶 淀粉酶主要來源于胰腺和唾液腺。1.參考值：血清：800～1200u／L 尿液：1000～12000 u／L 2.臨床意義：1）急性胰腺炎： 2）胰腺癌：早期。 3）胰管受阻：膽囊炎、膽石癥、胰腺癌早期、胃腸 穿孔等。慢性胰腺液 、胰腺癌晚期。 血清肌酸激酶 同工酶： CK-BB(快速部分)：平滑肌、神經(jīng)、腦組織 CK-MB(中速部分)：心肌 CK-MM(慢速部分)：骨骼肌 1.參考值： 酶偶聯(lián)法：男性 38~174 U/L. 女性 26~140U/L. 2.臨床意義： 增高（1）急性心肌梗死 （2）心肌炎和肌肉疾病 （3）溶栓治療 （4）手術(shù) 降低：長期臥床、甲亢、激素治療。 同工酶檢測： 1.CK-MB增高: 急性心肌梗死、其他心肌損傷、肌肉疾病及手術(shù)。 2.CK-MM增高：急性心肌梗死、其他：骨骼肌疾病。 3.CK-BB增高：神經(jīng)系統(tǒng)疾病、腫瘤。乳酸脫氫酶心肌骨骼肌和腎臟含量最豐富肝脾、胰腺、肺、以及腫瘤組織、紅細(xì)胞含量也很豐富。同工酶：LDH1 來源于心肌、腎臟、胰腺、紅細(xì)胞等。LDH2 LDH3：來自肺、脾、腦、甲狀腺等。LDH4 LDH5 肝、皮膚、骨骼肌、白細(xì)胞、血小板及膽汁等。1.參考值： 醋酸纖維膜電泳法： LDH1 ：0.24~0.34 LDH2:0.35~0.44 LDH3:0.19~0.27 LDH4:0~0.05 LDH5:0~0.02 2.臨床意義：（1）急性心梗LDH1和LDH2都增高。 LDH1增高明顯。（2）急性肝炎早期LDH5增高（3）阻塞性黃疸LDH4和LDH5都增高，LDH4增高明顯，歡迎點(diǎn)擊下載酶學(xué)檢測PPT課件。

臨床酶學(xué)檢驗技術(shù)介紹PPT：這是一個關(guān)于臨床酶學(xué)檢驗技術(shù)介紹PPT，主要介紹了1.酶活性的國際單位定義。2.酶活性測定的連續(xù)監(jiān)測法和定時法的概念。3.連續(xù)監(jiān)測法的計算和方法設(shè)計。4.酶活性測定最適條件的概念和意義。5.ALT、AST、ALP、GGT、LD、CK測定參考方法原理和評價等等內(nèi)容。酶的概念：人衛(wèi)第六版 酶（enzyme）是由活細(xì)胞合成的、對其特異底物起高效催化作用的蛋白質(zhì)，是機(jī)體內(nèi)催化各種代謝反應(yīng)最主要的生物催化劑(biocatalyst)。 人衛(wèi)第七版 生物體內(nèi)的酶（enzyme）是對其特異底物起高效催化作用的蛋白質(zhì)和核糖核酸，前者是是機(jī)體內(nèi)催化各種代謝反應(yīng)最主要的催化劑。 酶促反應(yīng)表示為： 底物：Subestrate：S 產(chǎn)物：Product：P 酶 ：Enzyme：E 酶的化學(xué)本質(zhì)： 絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì)，稱這類酶為enzyme 具有催化功能的RNA被稱為核酶(ribozyme) 具有催化功能的DNA被稱為脫氧核酶(deoxyribozyme) 酶的研究歷史： 1926年J.B.Sumner首次從刀豆制備出脲酶結(jié)晶，證明其為蛋白質(zhì)，并提出酶的本質(zhì)就是蛋白質(zhì)的觀點(diǎn) 1982年T.Cech發(fā)現(xiàn)了第1個有催化活性的天然RNA——ribozyme（核酶），以后Altman和Pace等又陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了真正的RNA催化劑 1995年，Jack W. Szostak 研究室首先報道了具有DNA連接酶活性的DNA片段，稱之為脫氧核酶(deoxyribozyme) 臨床酶學(xué) 高診斷靈敏度 高診斷特異性 臨床酶學(xué)檢驗技術(shù) 酶活性測定 酶蛋白質(zhì)量測定 臨床酶學(xué)的歷史： 1908年Wohlgemuth用尿淀粉酶（AMY）診斷急性胰腺炎 1930s，LPS、ALP、ACP開始用于臨床——定時法 1950s，Karmen、La Due、Wroblewski等人建立了分光光度法，ALT、AST、CK、LD等酶活性測定應(yīng)用于肝膽疾病、心臟疾病的診斷——連續(xù)監(jiān)測法 1970s，同工酶和酶蛋白質(zhì)量測定 1980s，同工酶亞型 酶的特性（一）化學(xué)本質(zhì)：除核酶、脫氧核酶以外，為蛋白質(zhì)（二）高效催化性（三）高度特異性（四）可調(diào)節(jié)性（五）不穩(wěn)定性 絕對特異性(absolute specificity)：只能作用于特定結(jié)構(gòu)的底物，進(jìn)行一種專一的反應(yīng)，生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物，歡迎點(diǎn)擊下載臨床酶學(xué)檢驗技術(shù)介紹PPT哦。