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真菌ppt下載

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素材格式:
.ppt
素材上傳:
lipeier
上傳時間:
2018-10-09
素材編號:
214794
素材類別:
課件PPT

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真菌ppt

這是真菌ppt,包括了真菌的生物學(xué)性狀,真菌的致病性,抗真菌的感染免疫,真菌感染的實驗室診斷,真菌感染的防治原則,水產(chǎn)動物常見致病真菌介紹,真菌的特征,真菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu),真菌的生長,真菌的抗抗力,真菌的分類等內(nèi)容,歡迎點擊下載。

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第三章 真菌學(xué)第一節(jié) 真菌的生物學(xué)性狀第二節(jié) 真菌的致病性第三節(jié) 抗真菌的感染免疫第四節(jié) 真菌感染的實驗室診斷第五節(jié) 真菌感染的防治原則第六節(jié) 水產(chǎn)動物常見致病真菌介紹第一節(jié) 真菌的生物學(xué)性狀 1 真菌的特征 2 真菌的形態(tài)和結(jié)構(gòu) 3 真菌的生長 4 真菌的抗抗力 5 真菌的分類 1、真菌(Fungi)的特征細(xì)胞壁:不含肽聚糖,含有殼多糖(chintin,又名幾丁質(zhì))和葡聚糖;植物的細(xì)胞壁主要是纖維素;具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu):有核膜和核仁,有DNA和組蛋白組成的線狀染色體;胞漿內(nèi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體和線粒體;營養(yǎng)方式:異養(yǎng)型,以腐生、寄生、共生或超寄生方式吸收養(yǎng)料;動物一般是先攝取,再消化,稱為消化型生物;而真菌卻釋放多種水解酶至體外,先把底物降解為小分子,然后再把它們吸收到體內(nèi),稱為吸收型生物。形態(tài):少數(shù)單細(xì)胞,多為分支或不分支的絲狀體;繁殖:能進(jìn)行有性和(或)無性繁殖,產(chǎn)生孢子;產(chǎn)生的孢子大多數(shù)無鞭毛;當(dāng)有鞭毛時也無鞭葺毛;是生物界中獨立的一大類群生物——真菌界(Kingdom Fungi)。 2、真菌的形態(tài)與結(jié)構(gòu) 2.1 形態(tài)酵母(yeast):呈圓形或卵圓形,直徑約5-8 µm。霉菌(mold):由菌絲和孢子組成,故又稱為絲狀菌(filamentous fungus)。二相性真菌(dimorphic fungus):有些真菌可因環(huán)境條件改變而發(fā)生絲狀菌或酵母兩種形態(tài)的互變,稱為。如組織胞漿菌、皮炎芽生菌等,它們在普通培養(yǎng)基上環(huán)境溫度培養(yǎng)時一般呈絲狀菌形態(tài),在體內(nèi)或液體中生長時則常常呈酵母狀態(tài)。 2.2 菌絲大多數(shù)霉菌在適宜培養(yǎng)基上生長時能長出中空、細(xì)長的微管(橫徑約2-10 µm),稱為菌絲(hypha)。細(xì)菌細(xì)胞(<2 µm)大菌絲又能長出許多分枝,交織成團(tuán),稱為菌絲體(mycelium)。根據(jù)菌絲功能可分為:營養(yǎng)菌絲體(vegetative mycelium)氣生菌絲體(aerial mycelium)生殖菌絲體(reproductive mycelium)。 有隔菌絲(septate hypha):大部分菌絲間隔一定空間距離有橫隔,稱為隔膜(septum),隔膜中有孔,可允許胞漿通過。隔膜將一條菌絲分隔成數(shù)個細(xì)胞,橫隔之間為一個細(xì)胞,可含有一至數(shù)個核。有隔膜 的菌絲稱為有隔菌絲。如皮膚癬菌、曲霉等。無隔菌絲(nonsepate hypha)有些真菌菌絲中無橫隔,一條菌絲即為一個細(xì)胞,其中可含有多個細(xì)胞核,無隔膜的菌絲,稱為無隔菌絲。如毛霉和根霉等。菌絲形態(tài):螺旋狀、球拍狀、結(jié)節(jié)狀、鹿角狀等。 2.3 孢子(spore)真菌的繁殖細(xì)胞,一條菌絲上可長出多個孢子,在環(huán)境條件適宜時,孢子又可伸出芽管,發(fā)育成菌絲體。真菌孢子易于傳播,對不利環(huán)境的抵抗力強(qiáng),因此,孢子大大增強(qiáng)了真菌的生存能力。真菌孢子:有性孢子和無性孢子有性孢子是指真菌通過同一菌體或不同菌體上兩個細(xì)胞融合,并經(jīng)減數(shù)分裂而形成的孢子,如接合孢子(zygospore),子囊孢子(ascospore)和擔(dān)子孢子(basidiospore)。接合孢子是一種體積大、胞壁較厚的孢子。子囊孢子在一種稱為子囊的結(jié)構(gòu)內(nèi)形成。擔(dān)子孢子子通常在一種稱為孢子臺的基座頂端形成。 無性孢子:不發(fā)生細(xì)胞間融合,它們一般由真菌菌絲通過有絲分裂方式產(chǎn)生,因此在遺傳形狀上與其前代完全相同。病原性真菌大多形成無性孢子,無性孢子的形狀、顏色和排列有助于真菌的鑒別。常見的有分生孢子(conidium)由菌絲末端細(xì)胞分裂形成,也可在菌絲側(cè)面出芽形成,它又可分為體積較大,由多個細(xì)胞組成的大分生孢子和體積小,只含有一個細(xì)胞的小分生孢子。孢子囊孢子(sporangiospore)菌絲末端膨大形成孢子囊,囊內(nèi)細(xì)胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生許多孢子子,孢子成熟則破囊而出。 芽生孢子(blastospore)由菌絲體細(xì)胞出芽生成,常見于單細(xì)胞真菌。一般芽生孢子長到一定大小即與母體脫離,若不脫防則形成假菌絲,如假絲酵母。厚膜孢子(chlamydospore)可由菌絲細(xì)胞分化形成。在不利環(huán)境下菌絲細(xì)胞內(nèi)胞漿濃縮,胞壁增厚,抵抗力增強(qiáng)。當(dāng)環(huán)境有利時,厚膜孢子又可出芽繁殖,如假絲酵母。關(guān)節(jié)孢子(arhtrospore)在陳舊的培養(yǎng)物中,菌絲細(xì)胞壁變厚,形成長方形的節(jié)段,呈鏈狀排列,如球孢子菌。 孢子從母體真菌釋放可具有主動和被動兩種方式。在風(fēng)和水等外力作用下,使孢子從母體脫離的方式稱為被動釋放方式。菌絲的某些部位變得脆弱,內(nèi)部壓力卻明顯增加,最終導(dǎo)致孢子的釋放,稱為主動釋放方式。真菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點在醫(yī)學(xué)上具有重要意義。真菌細(xì)胞壁主要成分為幾丁質(zhì)和葡聚糖,因此對作用于葡聚糖的抗菌菌藥卡泊芬凈(caspofungin)敏感。另外,真菌細(xì)胞膜中主要含麥角固醇(ergosterol),這不同于人類細(xì)胞膜中的膽固醇,因此,它們對兩性霉素B和某些唑類藥物如氟康唑、酮康唑等敏感。 3、真菌的生長真菌的營養(yǎng)方式主要有3種:腐生方式:利用死的動、植物和微生物殘體生存;寄生方式:寄生在動、植物的活組織內(nèi),同時對被寄生物產(chǎn)生不利的影響;共生方式:寄生在動、植物的活組織內(nèi),同時對被寄生物產(chǎn)生有益的影響。大多數(shù)真菌主要以腐生方式生長,但許多在醫(yī)學(xué)上有重要意義的真菌均為寄生菌,如白假絲酵母、新生隱球菌等均為人體條件致病菌。 大多數(shù)真菌是需氧菌,少數(shù)兼性厭氧菌。另有在污水和污物的處理器中發(fā)現(xiàn)一些厭氧真菌。真菌對營養(yǎng)要求不高,在一般培養(yǎng)基上均能生長。實驗室常用沙保(Sabouraud)培養(yǎng)基。其主要含有蛋白胨、葡萄糖和瓊脂。有些病原性真菌如白假絲酵母、新生隱球菌等需要先用血瓊脂平板培養(yǎng),待生長后移種沙保培養(yǎng)基,并做玻片小培養(yǎng),觀察其結(jié)構(gòu)。真菌的繁殖能力強(qiáng),但生長速度比細(xì)菌慢,常需1-4周才能形成菌落。 4、真菌的抵抗力真菌的菌絲和孢子均不耐熱,一般于60-70℃ 1h即被殺死。對干燥、紫外線和多種化學(xué)消毒劑耐受性較強(qiáng),但對于1%-3%苯酚溶液、2.5%碘酒、2%甲紫和10%甲醛溶液則較敏感。真菌對常用的抗生素如青霉素、鏈霉素及磺胺類藥物不敏感,但對于制霉菌素、兩性霉素B、酮康唑等對多種真菌有抑制作用。 5 真菌的分類 Ainsworth and Bisby‘s Dictionary of the Fungi <<安·貝氏真菌詞典>> 1983年第七版,分類主要依據(jù)營養(yǎng)方式、胞壁成分和形態(tài)特點真菌界(菌物界) (Mycetalia)(2門)粘菌門(Myxomycota)真菌門(Eumycota)真菌門(Eumycota)(4亞門、18綱、66目、244科)鞭毛菌亞門(Mastigomycotina)接合菌亞門(zygomycotina)子囊菌亞門(Ascomycotina)擔(dān)子菌亞門(Basidiomycotina)半知菌亞門(Deuteromycotina) 1995年出版了第八版,2001年出版第九版。真核生物域(Domain Eukaryota)(3界)原生動物界(Kingdom Protozoa)假菌界(Kingdom Chromista)真菌界(Fungi)。假菌界(3門)絲壺菌門(Hyphochitriomycota)網(wǎng)粘菌門(Labyrinthulomycota)卵菌門(Oomycota)真菌界(4門和1類)子囊菌門(Ascomycota)擔(dān)子菌門(Basidiomycota)接合菌門(Zygomycota)壺菌門(Chytridiomycota)無性型真菌類(Anamorphic fungi) 課外閱讀文獻(xiàn) Kirk PM, Cannon PF, David JC, et al. Ainsworth and Bisby’s Dictionary of the Fungi. 9 th ed. Wallingford: CAB International, 2001. Hawksworth DL, Kirk PM, Sutton BC et al. Ainsworth and Bisby’s Dictionary of the Fungi. 8 th ed. Cambridge: CAB international,1995. http://www.doctorfungus.org 廖萬清 吳紹熙 病原真菌生物學(xué)研究與應(yīng)用 北京:化學(xué)工業(yè)出版社 2006.6 Brands, S.J. (comp.) 1989-2007. The Taxonomicon. Universal Taxonomic Services, Amsterdam, The Netherlands. [http://taxonomicon.taxonomy.nl/] 第二節(jié) 真菌的致病性真菌的致病力較弱,但能通過多種途徑、多種機(jī)制使機(jī)體患病。由真菌引起的疾病統(tǒng)稱為真菌病(mycosis)。真菌產(chǎn)生的一些毒素進(jìn)入機(jī)體還可導(dǎo)致全身或某些臟器的中毒癥狀,有的甚至可以致癌。此外,真菌感染還可能引起各類超敏反應(yīng)。 1、致病性真菌感染主要是外源性侵襲機(jī)體而致病,包括皮膚、皮下組織真菌感染和全身或深部真菌感染。淺部真菌感染如皮膚癬菌等有嗜角質(zhì)性,能產(chǎn)生角蛋白酶和脂酶分解角質(zhì)和細(xì)胞脂質(zhì),并在局部大量繁殖后通過機(jī)械刺激和代謝產(chǎn)物的作用,引起局部炎癥和病變。二相性真菌如莢膜組織胞漿菌、皮炎芽生菌等進(jìn)入機(jī)體后轉(zhuǎn)換成酵母型,它們在巨噬細(xì)胞中不被殺滅而繁殖擴(kuò)散,從而引起慢性組織肉芽腫和組織潰瘍壞死。 2、條件致病性真菌感染該感染主要是一些內(nèi)源性真菌引起,如假絲酵母、新生隱球菌、曲霉、毛霉等。感染多發(fā)在機(jī)體免疫力降低時,如長期應(yīng)用廣譜抗生素、皮質(zhì)激素、放化療患者,腫瘤、糖尿病、艾滋病、免疫缺陷患者等,如白假絲酵母屬于人體的正常菌群,但抗生素使用不當(dāng)時可大量生長引起疾病。 3、真菌中毒癥某些真菌污染作物、糧食、飼料和餐品后,可產(chǎn)生真菌毒素(myxotoxins),動物和人攝入后可引起急性或慢性中毒,稱為真菌中毒癥(mycotoxicosis)。真菌中毒和一般細(xì)菌性或病毒性感染有所不同,它是在糧食和食物中產(chǎn)生毒素,因此受環(huán)境條件及飲食習(xí)慣等因素的影響,發(fā)病有地區(qū)性和季節(jié)性,但沒有傳染性。 不同真菌毒素作用的靶組織各異:雜色曲霉毒素主要為肝臟,赭曲霉毒素主要為腎臟,展青霉毒素主要為神經(jīng)系統(tǒng)。黃曲霉毒素對肝、腦、腎均有明顯毒性作用。 4、真菌毒素與腫瘤某些動物 和腫瘤與真菌毒素有關(guān),如赭曲霉毒素(ohratoxin)可致小鼠腎癌,鐮刀菌T-2毒素可誘發(fā)大鼠胃癌、胰腺癌、垂體和腦腫瘤,展青霉不經(jīng)皮下注射可引起大鼠肉瘤等。在所有真菌毒素中對環(huán)境污染最嚴(yán)重,對人畜危害最大的是黃曲霉素(aflatoxin,AF),它主要由黃曲霉、寄生曲霉等少數(shù)曲霉產(chǎn)生,以污染玉米、花生、堅果等農(nóng)作物及其制品為主。 AF是已知致癌化學(xué)物質(zhì)中毒性最強(qiáng)的一種。能誘導(dǎo)p53抑癌基因突變,導(dǎo)致p53蛋白缺失,使肝細(xì)胞生長失控,引發(fā)肝癌。此外它也能引起腎、胃、支氣管、腺體和皮下組織的癌腫。 5、真菌超敏反應(yīng)性疾病真菌孢子常散布于空氣中,敏感患者吸入或食入時,可引起各種類型超敏反應(yīng)性疾病,如蕁麻疹、變態(tài)反應(yīng)性皮炎、鼻炎、哮喘等。臨床上常見的“皮真菌疹(dermatophytids)”就是一種真菌抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生的超敏反應(yīng)。第三節(jié) 抗真菌感染免疫機(jī)體的抗真菌感染免疫同其他抗原微生物感染一樣,也包括天然免疫和獲得性免疫,兩者互相補(bǔ)充,共同配合,缺一不可。 1、天然免疫皮膚黏膜屏障中性粒細(xì)胞具有吞噬和殺滅真菌的作用。巨噬細(xì)胞在抗真菌感染中也有一定作用,但不如中性粒細(xì)胞。 NK細(xì)胞真菌組分是補(bǔ)體替代途徑的強(qiáng)激活劑,但真菌能抵抗補(bǔ)體攻膜復(fù)合物的殺傷。補(bǔ)體活化產(chǎn)生的C3a、C5a,可招引炎性細(xì)胞至感染部位。 2、獲得性免疫真菌感染可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫,其中又以細(xì)胞免疫為主。特異性抗體可阻止真菌與宿主細(xì)胞或組織的黏附,并提高吞噬細(xì)胞對真菌的吞噬率。特異性細(xì)胞免疫中CD4+ T細(xì)胞產(chǎn)生并釋放IFN-γ和IL-2等細(xì)胞因子,激活巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞和CTL等,參與真菌的殺滅。 AIDS、腫瘤患者和長期使用免疫抑制劑者的細(xì)胞免疫功能低下,故易受播散性真菌感染。 第四節(jié) 真菌感染的實驗室診斷 1、標(biāo)本的采集應(yīng)在用藥前采集標(biāo)本,淺部感染真菌的檢查可采用70%乙醇溶液棉球擦拭局部后取皮屑、毛發(fā)、指(趾)甲屑等標(biāo)本。深部感染真菌的檢查可根據(jù)病情取血液、腦脊液、淋巴結(jié)穿刺液等標(biāo)本,液體標(biāo)本可用離心方法富集待檢菌,取材時注意無菌操作,及時送檢。 2、直接鏡檢取標(biāo)本置于載玻片上,加1滴浮載液(生理鹽水、KOH溶液、墨汗、棉藍(lán)等),蓋上蓋玻片,放在酒精燈上微微加熱,不使沸騰,然后輕壓玻片,再用吸紙吸去周圍的溢液,即可在顯微鏡下進(jìn)行觀察,先在低倍鏡下觀察有無真菌菌絲或孢子,再用高倍鏡觀察菌絲或孢子的形態(tài)及特征等。 3、真菌分離培養(yǎng)和鑒定將標(biāo)本先經(jīng)70%乙醇溶液或2%苯酚溶液浸泡2-3min以殺死雜菌,用無菌鹽水洗凈后接種于含放線菌酮(抑制腐生真菌生長)和氯霉素(抑制細(xì)菌生長)的沙保培養(yǎng)基(隱球菌對這兩種藥物敏感,應(yīng)避免使用)。于25-28℃培養(yǎng)數(shù)日至數(shù)周,然后觀察菌落特征。 4、免疫學(xué)診斷 5、分子生物學(xué)診斷法 6、毒素檢測第五節(jié) 真菌感染的防治原則真菌感染目前尚缺乏特異性預(yù)防方法。注意衛(wèi)生、避免與患者及污染的物品直接接觸。抗真菌藥物 針對細(xì)胞膜麥角固醇的藥物多烯類藥物兩性霉素B和制霉菌素,它們通過與麥角固醇結(jié)合干擾其代謝,增加胞膜通透性而導(dǎo)致真菌死亡;唑類藥物較多如酮康唑、克霉唑、咪康唑、氟康唑、伊曲康唑等,它們都作用于真菌依賴細(xì)胞色素P450的14a-固醇去甲基酶,抑制麥角固醇的生物合成。 丙烯胺類藥物如特比萘芬,它通過特異性地抑制角鯊烯環(huán)氧化酶的活性來減少麥角固醇的合成。抑制細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)尼克霉素,它通過競爭性抑制真菌細(xì)胞壁的上幾丁質(zhì)合成酶I、II的活性而破壞真菌細(xì)胞壁;卡泊芬凈,它對真菌1,3-ß-葡聚糖有明顯抑制作用。干擾真菌DNA和RNA合成有核苷類藥物如5-氟胞嘧啶等。 目前抗真菌藥不理想抗菌譜較窄、對某些組織的滲透力較弱、副作用大等。一些新的有潛力的抗真菌藥物正在研發(fā)中,并已有多個廣譜、高效、低毒的新藥進(jìn)入了臨床試驗。此外,有效的抗真菌中草藥有待于開發(fā)?拐婢幬矬w外藥敏試驗 稀釋法、擴(kuò)散法和E-試驗方法 趙俊英 王毓新 張文娟 真菌病診斷與治療 北京:人民出版社,2007.3 第六節(jié) 水產(chǎn)動物常見致病真菌介紹 一般認(rèn)為,對人和動植物有致病性的真菌稱為病原真菌。危害水產(chǎn)動物的真菌主要有水霉、棉霉、殺魚絲囊霉、鰓霉、魚醉霉、鐮刀菌以及鏈壺菌等。水產(chǎn)動物病原真菌危害較大,危害對象可以是多種水產(chǎn)動物的幼體和成體,也可以危害其卵。傳染來源既有外源性也有內(nèi)源性。其發(fā)生與否與魚體的健康狀況和溫度等環(huán)境因素密切相關(guān),由于殺滅真菌的藥物對機(jī)體有一定的毒副作用,真菌的抗體多數(shù)無抗感染作用,目前水產(chǎn)動物真菌病尚無十分有效的治療方法,主要是進(jìn)行早期預(yù)防和治療。 人和大多數(shù)動物的真菌病的感染形式多樣,包括有真正致病性真菌感染、條件致病性真菌感染、真菌過敏、真菌中毒和真菌毒素致癌等。真正致病性真菌感染主要是一些外源性真菌感染,引起的疾病有各種皮膚癬、皮下和全身性真菌感染。條件致病性真菌感染主要是由一些內(nèi)源性真菌引起的,這些真菌的致病性不強(qiáng),常見于各種原因使機(jī)體抵抗力降低或菌群失調(diào)時發(fā)生,如念珠菌、曲霉菌和毛霉菌引起的疾病。變態(tài)反應(yīng)中有些是真菌引起的,如鏈互隔菌、著色真菌、曲霉菌、青霉菌和鐮刀菌等可污染空氣環(huán)境,引起蕁麻疹、過敏性皮炎、哮喘、過敏性鼻炎等。真菌中毒是人和動物食用了某些真菌及其產(chǎn)生的毒素污染的食物和飼料而發(fā)生的疾病。 真菌毒素危害很大,毒性作用偏重于某些器官,如黃曲霉毒素、島青霉素等可引起肝損害,這類毒素為肝臟毒;桔青霉素可引起急性或慢性腎病變,稱為腎臟毒;黃綠青霉素可造成大腦和中樞神經(jīng)系紀(jì)的損害,稱為神經(jīng)毒;鐮刀菌毒素主要損害造血系統(tǒng),稱為造血組織毒等。真菌毒素致癌主要見于黃曲霉毒素。水產(chǎn)動物真菌病主要有三種類型,一種是體表受傷后真菌在受損部位寄生,稱為膚霉病。第二種是感染的真菌進(jìn)入機(jī)體使內(nèi)臟器官產(chǎn)生病變,稱為內(nèi)臟真菌病或全身真菌病。第三種是產(chǎn)毒性真菌污染飼料,造成水產(chǎn)動物中毒,稱為中毒性真菌病。 1、水霉病 Saprolegniasis Oomycota 有性繁殖:卵配,有藏卵器和雄器 reproduce sexually by oogonia eggs 無性繁殖:游動孢子囊和游動孢子reproduce asexually by zoospores,which are motile and can swim quite rapidly. Commonly require water for reproduction 菌絲:無隔菌絲 hyphae have few or no cross-walls (septa) An easy way to see oomycetes is to heat a few sesame seeds until they "pop" and then float three or four on the surface of some pond water in a dish. After a few days the oomycetes with form a thick white growth around the seeds. If you watch there carefully you may be able to observe the release of zoospores. Water molds (水霉)were once thought to be fungi Filamentous growth Feed on decaying matter like fungi Different from fungi Cell wall a mix of cellulosic(纖維質(zhì)) compounds and glycan(多聚糖)(Fungi: chitin) The nuclei within the filaments are diploid (Fungi: Haploid) The ultrastructure, biochemistry, molecular sequences of these organisms indicate that they belong with the Chromista(假菌) The free-swimming spores which are produced bear two dissimilar flagella, one with mastigonemes(葺鞭葺毛) Presence of the chemical mycolaminarin (粘昆布多糖),an energy storage molecule similar to those found in kelp(海藻)and diatoms (硅藻) 1.2生長特性氧氣 氧充足時,菌絲細(xì)長,生長茂盛,形成動孢子囊的時間要長些。水中雜質(zhì)較多,或數(shù)個菌落靠在一起的情況下,其菌絲細(xì)短,不易形成動孢子囊。水深 如果使死魚上的水霉置水下10cm-15cm深處,菌絲則細(xì)長,形成的動孢子囊細(xì);使死魚上的水霉靠近水面,其菌絲變得粗壯,形成的動孢子囊大而多,且易發(fā)生有性生殖。溫度 10℃~32℃都能生長,但15℃~20℃時生長最好,4℃~7℃時生長緩慢,4℃以下停止生長,-2℃~0℃處理3天菌絲萎縮,動孢子囊和厚垣孢子凍裂瓦解。在水溫超過18℃時,鰻魚的水霉病中止流行。 pH 最適生長pH7.2~7.4,pH6.4或pH8.0時可以生長,但較緩慢,pH4.8~`5.6時生長受到完全抑制,強(qiáng)酸強(qiáng)堿可以有效殺死水霉。 鹽分 主要存在于淡水,某些也常見于濕潤的土壤中和半咸的河口水域,鹽度高于2.8%的水域無水霉分布。4/10 000食鹽和20mg/L~30 mg/L重鉻酸鉀可抑制菌絲生長和孢子萌發(fā)。培養(yǎng)基:用沸水處理過的大麻子仁、大麥粒、小麥粒、糯谷、雞蛋黃、魚卵、蛙卵、蒼蠅、蟑螂、各種水生昆蟲分別置盛有無菌水的培養(yǎng)皿中均可用作培養(yǎng)水霉等水生真菌的基質(zhì),為防止雜菌污染,可在無菌水中加入鏈霉素,使最終濃度為20µg~100µg/ml。用于純培養(yǎng)的培養(yǎng)基有玉米粉瓊脂(17g玉米粉與1000 ml水調(diào)勻,60~70℃加熱2h,紗布過濾,在濾液中加15 g瓊脂,溶化后補(bǔ)充水分,115℃高壓滅菌30min。)和沙保勞培養(yǎng)基等。 1.3 病原性存在于一切淡水水域,國內(nèi)外養(yǎng)殖地區(qū)都有流行。對水產(chǎn)動物無種類選擇性,凡是受傷的均可感染,鮭科和鯉科魚類、黃鱔、河鱸、鰻鱺、河蟹、鱉、蛙等等對水霉都具有易感性。水霉以腐生方式生活,水霉病屬繼發(fā)性感染,不能感染健康魚體和正常的魚卵,一般從魚體的傷口入侵。在魚類或其他動物的免疫力下降時(寄生蟲、細(xì)菌、病毒感染)、搬運(yùn)、擁擠、過高投餌率、水體中有機(jī)物含量高、或水溫突然下降,會暴發(fā)水霉,是典型的機(jī)會性致病真菌。從魚卵到各齡魚。在密養(yǎng)的越冬池冬季和早春更易流行。死卵或未受精的卵容易著生水霉菌。虹鱒魚卵孵化時間較長,遭受水霉病較嚴(yán)重。發(fā)病水溫主要在18℃以下。 當(dāng)魚體表皮膚因理化因素,或細(xì)菌、病毒和寄生蟲等生物因素感染受損傷時,水霉侵入損傷部位,向內(nèi)外生長繁殖,入侵上皮及真皮組織,產(chǎn)生內(nèi)菌絲,引起表皮組織壞死。有時可見到菌絲穿過腸壁入侵腹腔后感染肝臟、脾臟、心臟、鰾等內(nèi)臟器官,引起病魚死亡。向外生長的菌絲,形成肉眼可見的白色棉絮狀物,俗稱“白毛病”。由于寄生于體表的霉菌能分泌大量蛋白質(zhì)分解酶,機(jī)體受刺激后分泌大量粘液,病魚開始焦躁不安、食欲減退、游動無力,最后死亡。單性水霉可引起鮭科魚類幼魚的內(nèi)臟真菌病,其最初侵入部位是胃的幽門部,隨后菌絲在腹腔內(nèi)大量生長繁殖。其主要原因可能是腸蠕動障得或腸道堵塞,餌料滯留胃內(nèi),導(dǎo)致孢子發(fā)芽或菌絲發(fā)育,寄生于胃壁而引起損傷,并向其它臟器擴(kuò)散。 在魚卵孵化過程中,魚卵因溶氧低等引起發(fā)育停止或死亡時,亦可感染水霉,內(nèi)菌絲入侵卵膜內(nèi),卵膜外長出大量外菌絲,產(chǎn)生“卵絲病”,俗稱“太陽籽”。 皮膚或鰓上長出較膚淺,典型的水霉感染很少滲透過表皮肌肉層,棉花狀物質(zhì),白毛病。 1.4 微生物學(xué)檢查 1)肉眼觀察和鏡檢 直接觀察魚體表有無棉毛狀的菌絲體,即可作出初步診斷。內(nèi)臟真菌病時,應(yīng)取臟器病料制作壓片后鏡檢。 2)分離培養(yǎng) 取病灶處組織,接種沙保勞等培養(yǎng)基后培養(yǎng),鏡檢分離真菌的無性和有性生殖特點,可進(jìn)一步確定病原體的種類。 1.5 防治 1)預(yù)防 注意避免魚體受傷,改善飼養(yǎng)管理,增強(qiáng)魚體抗病力。目前尚無防治水霉病的疫苗。但是用細(xì)菌疫苗免疫的網(wǎng)箱養(yǎng)殖草魚,其水霉發(fā)生率很低,其機(jī)制尚不清楚。 2)治療 用食鹽和小蘇打全池潑灑,使水中最終濃度分別為400mg/L。也可全池潑灑3mg/L~5 mg/L五倍子溶液;蛴眯路枩缫喝貪姙,使藥物在水體的濃度為5mg/L。 2、鰓霉病 Branchiomyces spp. 鰓霉屬(Branchiomyces)是鯉科魚類和其它淡水魚類鰓霉病的病原。Grimaldi等人(1973)根據(jù)瓊脂擴(kuò)散試驗結(jié)果,將其歸屬為水霉目。最近Liu K.C.et al對鰓霉的無性繁殖的超微結(jié)構(gòu)觀察,發(fā)現(xiàn)其動孢子囊內(nèi)的動孢子具有兩根鞭毛及動孢子囊形成情況,進(jìn)一步將其列入水霉科中的鰓霉屬。 2.1形態(tài)與繁殖特征 1)屬的形態(tài)及繁殖特征 菌絲纖細(xì)、無橫隔、有分支、彎曲,菌絲直徑6µm-25µm,因部位不同而變化較大。動孢子囊與菌絲的粗細(xì)相當(dāng),菌絲內(nèi)局部或全部均可形成孢子,孢子數(shù)量很多,成熟的動孢子呈球形,具兩根等長的鞭毛,單行或多行在襄內(nèi)排列。孢子是否具兩游現(xiàn)象?有性生殖情況如何?尚無詳細(xì)報道。 2)常見致病鰓霉的特征 從我國理科魚類和其它淡水魚類感染的鰓霉的菌絲形態(tài)結(jié)構(gòu)和寄生情況來看,致病種類主要鰓霉 Branchiomyces spp (Branchiomyces sanguinis & Branchiomyces demigrans )血鰓霉(B. sanguinis):只寄生在鰓的血管內(nèi),不向鰓外生長。菌絲直而粗壯,分枝少,通常單枝蔓延生長,幼期菌絲粗短,分枝較多,直徑多數(shù)為13.8µm ~20.7µm,有的達(dá)20µm~25µm,動孢子囊由菌絲局部形成,稍粗于菌絲直徑,其大小、長短變動較大。動孢子較大,成熟的動孢子一般為圓形,著兩根等長的鞭毛。孢子直徑為7.4µm~9.6µm,平均8µm,細(xì)長的菌絲只形成單行的動孢子,粗的菌絲有2~3行或更多行的動孢子。我國已從草魚、青魚和鰻鱺鰓上分離此種鰓霉。 穿移鰓霉(B. demigrans):菌絲纖細(xì)繁復(fù),分枝特別多,常彎曲成網(wǎng)狀分枝沿鰓血管伸展或從鰓組織向外生長,縱橫交錯,布滿鰓絲和鰓小片。菌絲直徑多為6.6µm~21.6µm。動孢子囊的形成,幾乎占整個菌絲,屬全菌絲產(chǎn)孢子方式,即在無性生殖期間生殖菌絲和營養(yǎng)菌絲沒有區(qū)別。動孢子較小,直徑為4.8µm~8.4µm。我國從青魚、鳙、鯪和黃顙魚鰓上觀察到此種鰓霉。 2.2 病原性鰓霉屬為寄生菌。草、青、鳙、鯪、黃顙魚、銀鲴等對鰓霉具有易感性,出現(xiàn)以鰓組織梗塞性壞死為特征的爛鰓病。其中鯪魚苗最為易感,發(fā)病率高,死亡率達(dá)70%~90%。我國南方各省均有流行。國外報道,血鰓霉主要感染鯉科魚類和丁魚歲和鰻鱺等淡水魚。穿移鰓霉主感染白斑狗魚和丁魚歲。該病主要發(fā)生于熱天,流行高峰季節(jié)為5~10月份20℃以上),往往呈急性病,1-2 d內(nèi)突然暴發(fā),出現(xiàn)大量死亡,尤其在水質(zhì)不良,池底老化,水中有機(jī)質(zhì)突然增多的養(yǎng)殖池容易發(fā)生. 癥狀 急性型的病魚,出現(xiàn)病情后幾天內(nèi)大量死亡,出現(xiàn)花鰓,呼吸困難,鰓上粘液增多。血栓形成和局部缺血組織學(xué):有隔分枝菌絲,菌絲內(nèi)有嗜伊紅(蘇木精-伊紅染色)圓形體(不動孢子) Branchiomyces sanguinis 通常僅限于鰓血管。 Branchiomyces demigrans通?纱┻^鰓絲血管壁進(jìn)入內(nèi)腔 2.3 微生物學(xué)檢查取病魚鰓組織壓片,顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)鰓絲內(nèi)具粗大的分枝菌絲,且菌絲內(nèi)有較多孢子即可診斷。 2.4 防治本病重在預(yù)防,尤其是防止從國外傳入,我國將其列為進(jìn)出境動物檢疫的二類傳染病。放魚前清除池中過多淤泥,并用生石灰或漂白粉消毒。在疾病流行季節(jié),定期灌注新水,保持水質(zhì)清新,溶氧充足,養(yǎng)殖水溫20℃以上。發(fā)病時應(yīng)迅速清除死魚,注入新水可減輕或控制病情。魚醉菌病 病原霍氏魚醉菌 Ichthyophonus hoferi [癥狀和病理變化] 專性病原菌,系統(tǒng)性真菌病,一旦侵入即難以醫(yī)治。最常見于血管化器官,如心、脾、腎和肝。急性型:需要幾星期發(fā)育,形成許多小白點,主要是由于真菌感染組織引起小的炎癥反應(yīng)。慢性型:強(qiáng)烈的、慢性炎癥反應(yīng)在不同器官呈白色或暗色結(jié)節(jié);皮膚呈沙紙狀或潰爛;歐洲虹鱒搖晃游動,侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。 流行情況該病是危害嚴(yán)重的真菌性疾病之一。歐洲、美洲和日本等地方養(yǎng)殖的虹鱒、鰤魚、竹莢魚等都曾由此病引起大批死亡。我國尚未報道有此病發(fā)生?赡苁怯捎谕段贡霍~醉菌感染的海水魚碎屑所引起,是經(jīng)口感染。傳染的適宜水溫在20℃以下和大降雨后,有較高的死亡率。防治方法主要是及時清除病魚和死魚,防治繼續(xù)傳染。不要用帶菌魚或病魚作飼料。目前無治療方法。 3、鐮刀菌屬(Fusarium) 在自然界廣泛分布,種類很多,有些種類是人、動物和昆蟲的病原菌;有些種類可侵染多種作物,引起病害;有些種類存在于糧食和飼料中,使其霉壞變質(zhì),產(chǎn)生多種對人和動物健康威脅極大的鐮刀菌毒素,引發(fā)中毒;一些種類寄生于對蝦和魚類,是對蝦、魚類鐮刀菌病的病原。 3.1形態(tài)及繁殖特征菌絲體比較直而少彎曲,具樹叉狀分枝,半透明,不具橫隔,直徑約2.2µm ~4.5µm。繁殖方法主要以形成分生孢子的方式進(jìn)行,分為小分生孢子和大分生孢子。小分生孢子呈卵圓形或橢圓形,無橫隔或有時有1個橫隔,長4µm ~13µm。大分生孢子近鐮刀形或新月形,有1~7個橫隔,多數(shù)為3個橫隔,長17µm~ 45µm。外界環(huán)境不良時,分生孢子還以厚垣孢子的形式出現(xiàn),厚垣孢子通常位于菌絲的末端,少數(shù)在中間,呈圓形或橢圓形,有時四、五個連在一起,成串珠狀。單個的直徑約7µm ~12µm。鐮刀菌的孢子形態(tài)見圖12-。有些鐮刀菌具有有性繁殖器官,即產(chǎn)生閉囊殼,其內(nèi)含有子囊及8個子囊孢子。 蝦類四種寄生性鐮刀菌的形態(tài)特征比較 黃文芳等(1995年)報道,在大口黑鱸皮膚潰爛病灶上分離一株鐮刀菌,經(jīng)鑒定初步認(rèn)為是一株鐮狀鐮刀菌(F.fusarioides)。菌絲為分枝分隔多細(xì)胞菌絲,直徑大小為2.3µm~ 5.2µm,具大型分生孢子,彎曲呈紡錘形或鐮刀形。在氣生菌絲的側(cè)生單瓶狀小梗上長出大分生孢子,少數(shù)長出兩個大分生孢子;小型分生孢子呈橢圓形或棍棒形;厚垣孢子出現(xiàn)在菌絲中間或頂端,單生或串生,圓形或橢圓形,表面光滑。在PSA培養(yǎng)基上呈棉絮狀菌絲,顏色從白色變?yōu)榈稚,培養(yǎng)基的顏色從培養(yǎng)基本色變?yōu)楹诤稚;在PDA培養(yǎng)基上,菌絲顏色從白色變?yōu)辄S色,培養(yǎng)基的顏色變?yōu)辄S褐色。在1%~6%NaCI濃度和pH值在6.4~9.86的范圍中生長發(fā)育最好。 3.2 培養(yǎng)特性鐮刀菌的生長適溫為25℃, pH值在4~11范圍均能生長,最適為pH5~10。最適NaCl濃度為0~5%,增加濃度有抑制作用,NaCl濃度達(dá)11%時完全不能發(fā)育。在Nycosrl瓊脂(MA)平板上的菌落最初呈淺褐色,以后中央變?yōu)樯詈稚,邊緣淺褐色,由于色素擴(kuò)散,菌落周圍及下部的培養(yǎng)基呈深褐色。菌落為圓形,平坦,中部稍隆起,出現(xiàn)白色棉絮狀的氣生菌絲。在老培養(yǎng)物中,氣生菌絲常形成圍繞中心的圓環(huán),表面有白色細(xì)粉末,這是由于成熟的分生孢子從氣生菌絲中產(chǎn)生的緣故。分生孢子對不良環(huán)境的抵抗力強(qiáng),在無菌海水中,-5℃可存活150天,25℃存活300天,35℃存活180天,在室外自然干燥條件下存活140天。 3.3 病原性日本對蝦、中國對蝦、桃仁對蝦、羅氏沼蝦和龍蝦對鐮刀菌均具有易感性。鐮刀菌主要寄生在鰓組織內(nèi),也寄生在附肢基部、體壁和眼球上。發(fā)病初期鰓、附肢、體表等部位出現(xiàn)淺黃色或桔紅色斑塊,隨著病情發(fā)展,色斑變?yōu)闇\褐色,鰓產(chǎn)生黑色素沉積,使鰓的外觀呈點狀或絲狀黑色素條紋,嚴(yán)重時鰓呈黑色并發(fā)生潰爛,故稱“黑鰓病”。病蝦呼吸機(jī)能受阻,體色轉(zhuǎn)暗,活力差,游動緩慢、反應(yīng)遲鈍、攝食減少、最后靜臥池底而死亡。致死率高達(dá)90%以上。 流行情況鐮刀菌是甲殼類的一種危害很大的病原。其宿主種類和分布地區(qū)都很廣,在海水和淡水中都存在。各種對蝦,美州龍蝦及淡水的羅氏沼蝦等也可受危害。但斑節(jié)對蝦對它有抵抗力。國外報道主要是發(fā)生在養(yǎng)成的對蝦上,我國則主要是發(fā)生在越冬的親蝦上,常并發(fā)細(xì)菌感染,可引起越冬親蝦大批死亡。 美國的加州對蝦對此病最為敏感,感染率可高達(dá)100%,死亡率高達(dá)90%,其次為藍(lán)對蝦和萬氏對蝦。 鐮刀菌為一種典型的機(jī)會致病茵,即對蝦由于受傷、摩擦、受化學(xué)物質(zhì)或其他生物的損害后,病原才趁機(jī)侵入。 3.4 微生物學(xué)檢查 1)鏡檢 取病蝦的鰓等病變組織制成水浸片,置于顯微鏡下觀察,看到有大量的鐮刀菌的菌絲和分生孢子。有時可見到分生孢子逸在鰓絲的頂端,呈花簇狀排列。 2)分離培養(yǎng) 取病灶材料接種薩氏葡萄糖瓊脂或加有雙抗(青、鏈霉素)的其它普通真菌培養(yǎng)基,于適溫下培養(yǎng)3~4d,可見到大或小的分生孢子,菌落機(jī)培養(yǎng)基可呈現(xiàn)特有的色素,根據(jù)大、小分生孢子的形態(tài),分隔及產(chǎn)生的顏色等對鐮刀菌的種類作出鑒定。 3.5 防治目前尚無理想治療方法。主要是在早期進(jìn)行預(yù)防,如池塘放養(yǎng)前用生石灰清塘。起捕、運(yùn)輸及日常管理時應(yīng)細(xì)心操作,盡量避免蝦體受到損傷。發(fā)病時,可試用三氯異氰尿酸全池潑灑,其最終濃度為0.3mg/L。 4、鏈壺菌屬 (Lagenidium) 4.1形態(tài)及繁殖特征鏈壺菌菌絲分枝,一般不分隔,彎曲,直徑7.5µm-40µm。菌絲成熟后,從菌絲上長出細(xì)長的排放管,排放管直線形,穿過蝦、蟹外殼,伸到寄主體外,菌絲原生質(zhì)流向末端而膨大,形成球形或橢圓形頂囊。在頂囊內(nèi)形成許多具有2根鞭毛的游動孢子,成熟的游動孢子從頂囊逸出后,在水中游動一段時間,脫去鞭毛,形成休眠孢子,休眠孢子呈圓形,直徑約10µm,當(dāng)遇到寄主后,就發(fā)芽長出新的菌絲。動孢子放出后,頂囊消失。 離壺菌和海壺菌與鏈壺菌十分相似,其主要區(qū)別在于其游動孢子在菌絲體內(nèi)形成,然后,通過排放管端開孔直接排放于水中,不形成頂囊。其次,海壺菌的動孢子發(fā)育成菌絲的過程中具有多次游動、多次休眠及單型性(多次動孢子的形狀均相同)的特點。離壺菌的老菌絲的頂端會形成膨大的卵圓形構(gòu)造,但不是頂囊。 4.2 生長特性鏈壺菌在5℃~35℃,含鹽0%~6%,pH6 ~ 10時均可生長,適宜生長溫度25℃~35℃,含鹽0%~2%,pH值6~10。離壺菌也與此相似。海壺菌在2℃~35℃,含鹽0%~10%,pH4~10時均可生長,適宜生長溫度15℃~30℃,含鹽0%~3%,pH值6~10。 4.3 病原性鏈壺菌等霉菌引起的鏈壺菌病在國內(nèi)外均很常見,主要危害對蝦、龍蝦、蟹和貝類等的卵和幼體,尤以蚤狀期和糠蝦期最為嚴(yán)重。一旦感染發(fā)病,如不及時治療,13天內(nèi)可使全池幼體死亡。受感染的幼體游動不活潑,不攝食,趨光性差,身體逐漸變成灰白色,不透明,體質(zhì)衰弱,不久便會死亡,死亡后的幼體體表也長出絨毛狀的菌絲。被感染的卵,體積變小,不透明,在橘黃色的蟹卵團(tuán)塊上生病的卵呈褐色,在黑色或褐色的蟹卵團(tuán)塊上生病的卵呈淺灰色,受感染的卵粒不能孵化。幼蝦和成蝦可以帶菌而不出現(xiàn)任何癥狀,從而構(gòu)成傳染源,造成本病發(fā)生與發(fā)展。 [癥狀] 寄生于蝦卵和各級幼體,病蝦因游泳力下降而沉底,24h內(nèi)出現(xiàn)大量死亡,在病死的蝦卵或幼蝦內(nèi)充滿了菌絲。 4.4微生物學(xué)檢查 1.用顯微鏡檢查被感染的卵或幼體,在疾病早期就可觀察到有大量分枝彎曲的菌絲寄生,嚴(yán)重時菌絲可穿出體表成絨毛狀。病死后期菌絲充滿組織,體表有成熟菌絲向體外伸出的排放管、頂囊等,即可作初步診斷。再根據(jù)菌絲形態(tài)、游動孢子形成方式、排放塔的形態(tài)和頂囊等區(qū)別病原種類。 2.用PYG瓊脂(蛋白胨葡萄糖酵母膏瓊脂)或其它類似的霉菌培養(yǎng)基從病體分離培養(yǎng)致病真菌。 4.5 防治 1.用漂白粉對沉淀池、魚苗池進(jìn)行徹底消毒。 2.由于鏈壺菌等致病霉菌在死的卵或幼體上高長率特別快,在有機(jī)質(zhì)多的水中感染高,因此,應(yīng)及時清除已死的幼體和卵,注意調(diào)節(jié)水質(zhì),加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,經(jīng)常檢查產(chǎn)卵親體,一旦發(fā)現(xiàn)本病,立即全池潑灑制霉菌素,使池水成60mg/L濃度,或遍灑亞甲基藍(lán),濃度為10~20mg/L;尹S霉素(Griseofulvinum)口服的抑真菌抗菌藥,對體表的各種癬菌有強(qiáng)大的抑菌,對其他的真菌和細(xì)菌無效。干擾真菌DNA合成。無殺菌作用。本品口服和外用對深、淺真菌病均有一定療效。對淡水魚、魚卵、中華絨螯蟹、中華鱉的水霉病、鰓霉病均有防治作用。未見有耐藥菌株出。本品對水霉、綿霉、鰓霉、魚醉菌、絲囊霉菌、鐮刀菌、鏈壺菌等有較好的抑制作用。用于防治水生動物的膚霉病、鰓霉病、虹鱒內(nèi)臟真菌病、魚醉菌。ê琪V、紅點鮭、各種熱帶魚及師魚)、烏鱧、香魚流行性潰瘍綜合征、南美白對蝦、南美白對蝦、美洲龍蝦和淡水的羅氏沼蝦的鐮刀菌病、長毛對蝦、斑節(jié)對蝦幼體的鏈壺菌病、鱉白毛病。 用法與用量口服 魚類每日15-30 mg/kg體重,中華絨螯蟹、中華鱉每日20-40 mg/kg體重,分2次投喂,連用3-6d. 浸浴 用灰黃霉素與1%食鹽和碳酸氫鈉(小蘇打)合劑(1:1)配成8 mg/L濃度的溶液浸浴魚和魚卵10 min左右。休藥期 500度日 克霉唑(clotrinazolum)別名 三苯甲咪唑,抗真菌一號,氯典馬唑,氯三苯甲咪唑,Canesten, Canifug, Chlortritylimidazole, Clotrimazole, Empecid等。本品為可內(nèi)服廣譜抗真菌藥,對多種病原性真菌都有抑制作用。該藥性小,內(nèi)服易吸收,但僅為抑菌藥,停藥過早易引起復(fù)發(fā)。本品口服和外用對深、淺真菌病均有一定療效。本品對水霉、綿霉、鰓霉、魚醉菌、絲囊霉菌、鐮刀菌、鏈壺菌等有較好的抑制作用。用于防治水生動物全身性和深部真菌性感染。本品對淡水魚、魚卵、鱘魚、中華絨螯蟹、中華鱉的水霉病、鰓霉病、虹鱒內(nèi)臟真菌病、魚醉菌。ê琪V、紅點鮭、各種熱帶魚及師魚)、烏鱧、香魚流行性潰瘍綜合征、南美白對蝦、南美白對蝦、美洲龍蝦和淡水的羅氏沼蝦的鐮刀菌病、長毛對蝦、斑節(jié)對蝦幼體的鏈壺菌病均有明顯的作用。 用法與用量口服 魚類每日15-30mg/kg體重,中華絨螯蟹、中華鱉每日20-40mg/kg體重,分2次投喂,連用3-6d. 浸浴 用克霉唑與1%食鹽和碳酸氫鈉(小蘇打)合劑(1:1)配成8 mg/L濃度的溶液浸浴魚和魚卵10 min左右。休藥期 500度日07U紅軟基地

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