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HPV病毒的分子生物學探究 楊永強 目錄 一、高、中、低危型HPV 二、HPV檢測在臨床各階段中的意義 三、HPV的檢測 什么是HPV? HPV的分型 目前研究中，與人類癌癥存在相關性的病毒包括： 目前真正通過體外病理模型確認的只有HPV16，可導致宮頸癌。 并且在HPV這一病毒種屬中真正致癌的具體病毒型別仍尚待研究，已確認的致癌型別有，HPV16，18，31，45. （其中HPV16經體外病理模型證實，HPV18，45，31經流行病學證實。） HPV的分型 高危型HPV 中危型HPV 低危型HPV ★高、中、低危型不是依據其致癌性劃分，而是依據其致癌的可能性劃分的。 所以說，高危型不代表是致癌型，只是表示其致癌的危險性高。 人們最早發(fā)現的HPV型別是HPV6（Gissmann and zur Hausen，1980）和HPV11 (Gissmann et al.，1982) ，但它們并不能導致宮頸癌。 在研究HPV6和HPV11的致癌性過程中，才發(fā)現了真正的宮頸癌元兇HPV16 (Dürst et al.，1983)、HPV18 (Boshart et al.，1984) 。 HPV的致癌性研究 致癌因子可能包含所有的高危型HPV，但并不是所有的高危型HPV都已被確認為有必然的致癌性。 目前確認的是HPV16、18、31、45。 高危型HPV病毒致病機理 —L1、L2 、E6、E7基因的功能 HPV檢測在臨床各階段中的意義 檢測對象：宮頸分泌物中的脫落細胞 分泌物檢測的規(guī)范化 —內標的意義 現在已經世界衛(wèi)生組織采用和確認的標準為 β-globin gene（β-球蛋白基因） β-球蛋白基因（β-globin gene）是一種存在于上皮細胞中的管家基因，可作為宮頸上皮細胞的身份證，它的存在標志著臨床所取標本中一定含有宮頸上皮細胞，從而規(guī)范地避免了因臨床取樣未獲得足夠的（針對分子生物學實驗）宮頸上皮細胞而導致實驗結果的假陰性問題。 HPV檢測在臨床各階段中的意義 分型的同時定量 而但由于取樣等因素導致取到可檢測的宮頸脫落細胞不同，相應的病毒載量完全無可比性。而當我們引入內標后，通過相對定量值和內標值之間的換算，可得到該患者病毒載量的絕對定量值，甲為2×103拷貝數，乙為2×106拷貝數。 此時我們可得到準確的結果提示：乙患者感染HPV16型病毒載量遠遠高于甲，且乙患宮頸癌的風險屬高度。 雙色熒光，一管檢測多個型別 每個標本用3次實時平行擴增反應，通過兩種熒光基團對八種高危型HPV進行檢測。 基因分型: 主要高危型: HPV16，18， 45， 31. (建議對陽性患者進行下一步的檢查，如: TCT，陰道鏡，或病理活檢) 次要高危型: HPV33，52，58，67. (建議關注陽性患者的病毒量) 一種即高效又實用的臨床檢測方法 不僅分型，而且定量 雙熒光圖 深圳市醫(yī)學會檢驗醫(yī)學專業(yè)委員會第十屆年會暨第四屆深港澳檢驗醫(yī)學學術研討會圓滿成功！Kwk紅軟基地

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